使用非抗体方法检测您感兴趣的细胞类型中的ALDH活性

一枝独秀

能不能解决该检测分选与FITC/GFP颜色冲突的问题？？？

myboluo

请问您是杭州百通生物公司还是STEMCELL总公司的技术人员？
3 E6 ^2 D3 X) g" h7 n. z目前正在用你们公司ALDEFLUOR的kit做乳腺癌干细胞的分选，所用细胞系是MM231。
2 u7 E2 k: U$ Y上的是BACKMAN的Moflo，用7-AAD作了细胞活性的检测，活性都可以保证在95%，可是作了5次了每次结果都是阴性，甚至包括设立的作为阳性对照的A549细胞系。0 z/ u9 \: n! f/ B" T+ C1 F
拿细胞在荧光显微镜下观察也看不到绿色荧光。但是一次单染贴壁状态的A549时有很弱的绿色，并且绿光泛黄。但可以保证不是非特异或没洗干净。; c' J0 w8 h/ o* e7 u
我的指导老师之前留学的就是Max S. Wicha的实验室，所以操作理论上没有问题。' o/ A8 o/ H8 ^, |
盒子买回来4度放了快一年，等科里流式机子到了才开始做的。之前4月份活化的，活化后没有立刻分装，4度保存，现在怀疑是不是试剂过期……
! H2 @- v* w- n7 J我们本打算用ALDEFLUOR分BCSC，肯定会做到临床标本，所以用量会很大。* `6 S: q, z; p2 w
可是现在试剂问题不解决，估计会考虑换标记了，不知道您有什么好的建议