求脂肪干细胞组织块培养法是如何操作的

chenchen102002

用胶原酶消化法生长时间长，如何解决

your1024

这个问题我们倒是没有遇到过，就我个人而言我觉得酶消法比组织块要好用很多（主要是因为我组织块做的不好）。用0.1%的Ⅰ型胶原酶1~1.5ml，37℃摇床40min~1h，观察大组织块消失，消化液呈类似糊状就可以了。组织块的话，我们是剪碎之后，用巴氏吸管稍稍蘸取脂肪组织，探入T25瓶中将组织块贴到瓶壁（生长细胞的那一面，具体方式看你怎么舒服怎么来），注意贴壁的组织块的间隔要合适，另外不能靠边缘太近。之后加入大概1.5ml的培养基（注意，不能把组织块冲下来，所以此时要沿着没有组织的那一面加液）。之后旋紧盖子，贴壁面朝上放置在37℃孵箱，30min~1h之后轻轻翻转过来，注意别把组织块冲下来了。第二天换个液（T25的瓶加4~5ml培养基），之后就是正常培养了。

相宜

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# [8 o+ o$ J7 M- P# {( L我的QQ：68404281.你好 我最近也在养脂肪干细胞，望交流。

chenchen102002

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我想问一下，用胶原酶消化时脂肪与酶的用量是怎么计算的？