骨髓间充质干细胞成骨诱导时 细胞问什么总脱落

不苦的药

我用的是兔子骨髓间充质干细胞P2代的，在24 孔板接种，每孔3万个细胞。在融合70%左右开始成骨诱导，诱导10天左右，细胞就脱落死亡了，对照组和诱导组都出现这种状况，重复好几次都这样，不知为啥，难道是接种密度过高？请高手指教

zhj1988

密度太大，我十二孔板只用2万。

不苦的药

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请问你也养得的兔子骨髓间充质干细胞吗

hhxxattxs123

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" C, L0 x) |- i0 _! C" |+ w& m* W" J& e2 s% G
你说的脱落时什么样的脱落，一种是细胞铺满了24孔板，在此基础上，镜下出现了好多的亮点，另外就是细胞大部分都脱落，贴壁也很稀疏，这是不一样的处理方法的，我诱导的细胞现在铺满了，出现了一些亮点，出现的不是很多。

不苦的药

回复 hhxxattxs123 的帖子0 {8 B5 T* ~  P

! K, `5 w! a2 J% Z我的是大部分脱落，应该怎样处理

hhxxattxs123

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: g- o) Y1 b  a0 n5 v5 u0 f你细胞本身的状态如何？有没有老化？建议你用好一点的培养液和血清，状态好的细胞不容易脱落，另外你接种的密度不要太低了，先用低糖的培养液培养，至生长70%左右的时候，再换用诱导液诱导

huajie881026

铺层明胶吧

林觉

回复 huajie881026 的帖子' \. d4 K8 F2 D' K
2 K& U1 l( F4 G- {$ [9 s
铺层明胶你试过？

田甜

我记得成骨诱导的试剂盒中，一般配有明胶，接种细胞之前先铺明胶，就是为了避免细胞脱落，有一定效果。诱导后期，细胞容易脱落，建议换液改为半换，换液时间相对缩短点，换液时注意别对着细胞生长面加液体，缓慢滴加。

huangyan8902

% Y: x7 ~3 F; B3 `& B
! ?( @- u3 {! `% X* k8 T* c% o) [5 x接种前先用明胶包被个半小时，诱导时的密度控制在70%左右，诱导到15天左右3天换液改成2天半换液，卷边和漂浮的现象会少一点
1 A& A/ h& _6 m; o* Q5 L) G再加一点，培养基要37℃提前预热好