骨髓间充质干细胞成骨诱导时 细胞问什么总脱落

不苦的药

我用的是兔子骨髓间充质干细胞P2代的，在24 孔板接种，每孔3万个细胞。在融合70%左右开始成骨诱导，诱导10天左右，细胞就脱落死亡了，对照组和诱导组都出现这种状况，重复好几次都这样，不知为啥，难道是接种密度过高？请高手指教

zhj1988

密度太大，我十二孔板只用2万。

不苦的药

回复 zhj1988 的帖子# D7 `0 p+ n/ ?) j$ s% j

5 P5 G' x; ]% D4 C6 y/ k% f请问你也养得的兔子骨髓间充质干细胞吗

hhxxattxs123

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" Z) O3 q1 a/ L1 P8 `你说的脱落时什么样的脱落，一种是细胞铺满了24孔板，在此基础上，镜下出现了好多的亮点，另外就是细胞大部分都脱落，贴壁也很稀疏，这是不一样的处理方法的，我诱导的细胞现在铺满了，出现了一些亮点，出现的不是很多。

不苦的药

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我的是大部分脱落，应该怎样处理

hhxxattxs123

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你细胞本身的状态如何？有没有老化？建议你用好一点的培养液和血清，状态好的细胞不容易脱落，另外你接种的密度不要太低了，先用低糖的培养液培养，至生长70%左右的时候，再换用诱导液诱导

huajie881026

铺层明胶吧

林觉

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. e( v: r& q, C铺层明胶你试过？

田甜

我记得成骨诱导的试剂盒中，一般配有明胶，接种细胞之前先铺明胶，就是为了避免细胞脱落，有一定效果。诱导后期，细胞容易脱落，建议换液改为半换，换液时间相对缩短点，换液时注意别对着细胞生长面加液体，缓慢滴加。

huangyan8902

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( l) V' U: F0 r
接种前先用明胶包被个半小时，诱导时的密度控制在70%左右，诱导到15天左右3天换液改成2天半换液，卷边和漂浮的现象会少一点
7 r* N, l; M: @9 k' r再加一点，培养基要37℃提前预热好