大鼠胰岛分离的消化程度如何把握？

cjian6352

现在在做大鼠的胰岛分离，基本步骤是灌注8-10mL胶原酶V后摘取胰腺，放入装有hanks液的离心管中水浴消化约10min，振荡后过40目筛网。问题是检测过筛后的悬液，几乎检测不到胰岛。现在灌注非常成功，整个胰腺都能充分膨胀，所以我觉得是消化出了问题，但不知道问题出在哪里。我消化后振荡，胰腺仍是大块的组织连在一起，不像文献所说的呈“细砂状”，是不是消化还不够充分？那么要消化到什么程度呢？“细砂状”又是什么样子的？过筛后筛网上残留的组织还剩多少？筛下的悬液浑浊吗，能否看到细小沉淀？离心后沉淀多吗（我几乎得不到沉淀）？希望做过的前辈指点一下，最好能详细描述一下消化后的细节，细砂状的样子，还有过筛后是否还会有大块组织残留，离心后沉淀多少。多谢啦!