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楼主: hyf198675
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细胞污染问题   [复制链接]

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发表于 2012-5-3 15:52 |只看该作者
回复 sdwzg119 的帖子4 n& w1 g. J; x1 B! E: o* N
. U2 i6 q) U0 n
我还有个问题,放脐带的培养基能放很长时间吗?我是把瓶子拿给我同学,有时要放一周左右才能拿到脐带。
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发表于 2012-5-3 16:57 |只看该作者
回复 hyf198675 的帖子
: x8 n6 R3 }$ F4 c5 i% K8 x( H# k: N4 b# @
如果不考虑成本的话,凡事感觉可能污染的试剂、耗材最好弃用,不想丢就做无菌验证吧。举培养基只是个例子,胰酶等等,包括移液管在操作中只要是怀疑污染---丢弃,启用新的。这是杜绝污染的良方,不知道对你有一定的启示没有?
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发表于 2012-5-4 10:53 |只看该作者
我们养的也是脐带间充质干细胞,原代培养主要是霉菌和酵母菌感染,一般是产妇本身带的病原菌,而分离细胞时又没有加入专门针对真菌的抗生素。细菌污染的情况很少,除非是对多种抗生素均不敏感的院内感染的超级细菌。我觉得注意无菌操作和加入适当的抗生素可以避免绝大部分的污染问题。
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发表于 2012-5-4 11:31 |只看该作者
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回复 ontheway_hit 的帖子
, `6 N+ p6 ~( ?( `3 E/ Q( g4 M/ @# i& C3 H" B
可能是我无菌观念还不强,下次一定注意了,谢谢啊!

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发表于 2012-5-4 16:34 |只看该作者
回复 hyf198675 的帖子0 W' \( z" I5 ?, Y: I* i4 _+ s

$ k2 w' u9 t5 V$ X6 q/ f( P$ h有人是用带双抗和两性霉素B的培养基溶液,应该能存放很久,具体不清楚。我是直接给护士无菌的离心管盛放,马上拿回来处理,一样能行,但是原代总是有染菌率的,不过注意一些也不是太容易染菌。
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发表于 2012-5-4 16:45 |只看该作者
原代培养20天出现污染的话,根据我的经验,我是这样分析的,如果是材料污染那么,原代5天以内就会出现污染物了,20天才发现污染的话我想是你中间换液的问题了,要么操作、要么试剂,如果这两个都没问题的话,在你们操作的环境做下环境监测。看看是否环境不合格。不知道你是哪个地方的,现在天气越来越热了,实验室内环境应特别注意,其次还要注意个人卫生。' a2 n' I- _8 E& j( i
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发表于 2012-5-4 17:18 |只看该作者
操作和环境是污染的两大来源  首先要保证细胞间的大环境干净 每天的紫外照射 定期打扫 操作方面主要就是个人习惯了 实验之前拿酒精擦干净超净台和移液器 手上要经常喷酒精 碰到不该碰的地方的枪头移液管什么的果断扔掉 疑似污染的东西尽量都扔掉 总之 养成好的习惯
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发表于 2012-5-4 18:34 |只看该作者
回复 zarecol 的帖子! x  G3 M* `9 _
! J" z5 N# U0 Z% [6 B. m! J
言简意赅,受益匪浅,多谢!

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发表于 2012-5-4 18:42 |只看该作者
回复 不倒翁 的帖子! V) X1 {4 K4 g9 C: p
$ P5 h1 X. E% w: M9 C# N( B
实验室每天都要用紫外线照射消毒吗?实验室多长时间打扫一次?

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发表于 2012-5-4 19:02 |只看该作者
回复 hyf198675 的帖子
& ]+ C& q+ D5 X( p, E% p
& R% p& H; U2 v3 o; T+ v$ o我们的习惯是每天半小时的紫外 照紫外的时候关掉空调和通风 让臭氧尽量多的留在细胞间  细胞间两周彻底打扫一次 包括拖地 擦桌子 超净台 冰箱培养箱的门 培养箱换水等等 一般来说培养箱也要定期擦一下 这一点我们做的也不是特别好
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