如何切割干细胞

我不是小龙虾

刚刚培养出胚胎干细胞,但是用巴斯德管拉的管子切割干细胞团时把饲养层也切下来了.而且切的很乱.把切下来的小团细胞放到新鲜的饲养层上时贴壁了.但都两天了还没长,好像死了.怎么回事啊?请问各位你们都是如何切割肝细胞团的啊?

scienese

我也遇到了同样的问题，期待大家的解答！！

frankieisme

直接用移液枪吸，1ml的枪带上枪头，再套上一个10ul的小枪头（小枪头套在大枪头的前面），把克隆吸到另一ep管or离心管，反复吹打，把细胞吹散，之后接种到FEEDER上就可以了。

lxm5668

回复 frankieisme 的帖子2 o) u4 K% t/ a3 U; u; M3 D

/ T4 M- T6 O4 L, A9 j5 ^% J靠谱！

我不是小龙虾

谢谢啦...可以告诉我一般需要吸多少液体在离心管里吗?最后是直接把管里的液体全放入一个孔吗?

frankieisme

一般是把所需要克隆吸完为止,液体量可自行调整,少了再加,多了可把离心管静止10-30min,细胞自行沉降,再移走多余培养液.祝顺利!

我不是小龙虾

回复 frankieisme 的帖子2 a. w7 ^' U% R4 C( ?0 _% }
) d0 s% Z) H, W* g
恩恩...谢谢啦

cochongg

直接挑克隆，用10ul的移液器把细胞团吸出来。保证靠谱。
% [0 B; J: D! p4 C* V! b$ i然后消化在接到板上啊

我不是小龙虾

回复 cochongg 的帖子
; }6 k8 N  d0 k
- ~/ N$ V7 @4 h4 Q7 ?% g' B# W6 q恩....谢谢啦...但是我在用移液枪吸细胞团时,把饲养层也吸上来了...

cochongg

回复 我不是小龙虾 的帖子8 y% |) m$ _6 f$ @) k; C1 A, g

" [' \3 U. r# |6 K吸到feeder也没关系，# w9 e5 |3 U* f' o
1，要求无菌，% Z: z& Y  J: C8 j
2，多挑几个团，
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