如何切割干细胞

我不是小龙虾

刚刚培养出胚胎干细胞,但是用巴斯德管拉的管子切割干细胞团时把饲养层也切下来了.而且切的很乱.把切下来的小团细胞放到新鲜的饲养层上时贴壁了.但都两天了还没长,好像死了.怎么回事啊?请问各位你们都是如何切割肝细胞团的啊?

scienese

我也遇到了同样的问题，期待大家的解答！！

frankieisme

直接用移液枪吸，1ml的枪带上枪头，再套上一个10ul的小枪头（小枪头套在大枪头的前面），把克隆吸到另一ep管or离心管，反复吹打，把细胞吹散，之后接种到FEEDER上就可以了。

lxm5668

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) g$ k6 {) N9 a
靠谱！

我不是小龙虾

谢谢啦...可以告诉我一般需要吸多少液体在离心管里吗?最后是直接把管里的液体全放入一个孔吗?

frankieisme

一般是把所需要克隆吸完为止,液体量可自行调整,少了再加,多了可把离心管静止10-30min,细胞自行沉降,再移走多余培养液.祝顺利!

我不是小龙虾

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4 ]. @) X& ?( T2 J! v
恩恩...谢谢啦

cochongg

直接挑克隆，用10ul的移液器把细胞团吸出来。保证靠谱。
, l( r; ^) J8 _+ d" E  y  W- ^5 g然后消化在接到板上啊

我不是小龙虾

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/ F4 R" W$ S8 O3 O, O2 \7 R  `, }6 C5 }3 D  ^9 T. {3 ^  a. X  ?
恩....谢谢啦...但是我在用移液枪吸细胞团时,把饲养层也吸上来了...

cochongg

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" j9 l6 Y1 j- [9 z/ w
% d2 M$ x' [: {, ?0 b/ D; x吸到feeder也没关系，. s5 w, T7 V, D3 e0 H
1，要求无菌，
4 u. w+ H9 c# u2，多挑几个团，
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