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[讨论] 辐射处理feeder cells? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-5-8 13:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
有没有人辐射处理feeder cells的?求助:
; g' `8 Z% r0 [) P6 |1 F  j1. 如何处理细胞? 是直接贴壁时候处理,还是悬浮细胞处理?有文献报道,需制备细胞悬液,那悬液的密度呢?$ z+ Z7 L" I6 s( @4 S
2. 辐射剂量,有文献报道8,000 rad of X-ray irradiation or 3,000 rad of gamma irradiation,我们拥有的是X-ray irradiation machine,具体到底得用多少Gy?
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优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2012-5-8 21:48 |只看该作者
回复 laurel101 的帖子
# r" F" W# l; P% ?5 u4 ~* P! [& {" s0 L7 q$ p% t5 d6 g( s
照射feeder cells是在细胞生长状态较好的时候,密度适中时进行贴壁照射。
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-5-8 23:06 |只看该作者
可以把很多瓶细胞消化下来,集中到一个离心管中,然后悬浮辐照,一次就可以辐照很多。密度没有什么特别要求,我们一管最多辐照过10的9次方的细胞。1Grey=100rad, 辐照剂量我们用的是30grey。X和Gamma我们都用过,最终的辐照剂量都是一样的
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板凳
发表于 2012-5-9 01:21 |只看该作者
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8Gray  和 40 Gray 的feeder我们都用过,   是用来养mES5 U$ v7 a) ~7 X, H9 O4 N/ Y
8Gray 的feeder会长 特别在一般的MES培液里,在KSR里倒不长
9 P: P0 ]1 h4 m40Gray 的feeder死的会很多。
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报纸
发表于 2012-5-9 08:15 |只看该作者
我实验室用50的,Wicell的methods说最好1~2M/ml,每个50ml的tube状20ml,悬浮。以前也用过贴壁的,但搬运时容易洒出液体。
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地板
发表于 2012-5-9 08:27 |只看该作者
请问北京这边哪里能对外提供辐照处理?谢谢。

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发表于 2012-5-9 08:36 |只看该作者
悬浮细胞后进行照射,即方便又能一次照很多,暂时不用的可以冻存起来,可以先参考文献的辐射剂量照射一次,使用后没有问题就可的。如果想达到最好的效果,就自己摸索一下,尝试几个剂量进行照射,使用观察那个最好,后面就都采用这个剂量照射即可。
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