请教胚胎聚合方面的问题

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最近做胚胎聚合，可是胚胎一直聚合不上 ，我们在做的过程中发现，在去掉透明度后，仍有一层薄膜，胚胎一直聚合不上，想请教下这是怎么回事？
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have-a-rest

什么胚胎啊，透明带怎么去掉的？

zpzp0312

通常来说，透明带是可以去掉的
% P8 u7 W/ c$ M" {7 z  H如果遇到楼主这个情况应该是在去透明带时没有观察仔细
) h& d: ~0 e* ^6 i( P8 K: L( ?你可以把那些看似还有一层薄膜的胚胎处理时间延长一些，“过处理”一下，让若干容易去除透明带的胚胎多处理一段时间，到时候可以淘汰不用。剩下的胚胎透明带应该大部分都去除了。
$ {4 L) ]9 Y& R& d另外聚合过程中一定要在一个小的空间里进行$ U( \  [# R* G* q5 @
如果没有合适的工具2 h- P% X$ S9 k
也可以考虑使用一些促进细胞粘连的试剂
* \8 ^0 D) h2 a/ U楼主做的是ES聚合还是胚胎聚合（二倍体/四倍体）？
% d, N. D4 m$ `! o用的ES细胞和胚胎的品系都是什么啊？

461650833

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+ _# `3 w* a: N0 L  _* T3 w; c4 R( w$ h! A. j
猪孤雌胚胎啊 用的是pronase

461650833

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* o/ E( U9 Z: d  A- }& S' c
8 s! a4 @; \( u' w做的是猪孤雌胚胎聚合，做了几次都没有聚合上。
% x$ H$ `) B, N- j4 O- T你所说的小空间，可以是WOW培养系统吗？
& S" p9 o; u( i  p7 [# X  i* ]3 G促进细胞粘连的试剂可以用什么，植物凝集素可以不？

zpzp0312

看来你那里的实验室配套设施应该挺齐全的" w! n6 `, _7 h: u# S4 |9 O
说的都对
$ t5 n0 m1 {, J; m- @目前似乎就是透明带处理有问题了，多处理一段时间，通常来说在镜下应该能看出来是否已经除去透明带。6 g7 m" G5 C# ^0 F7 }
如果看不好就收集那些似乎沾到培养皿底部的胚胎，轻轻一吹就下来了。这样的胚胎透明带绝对已经去掉了！

461650833

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# e6 \9 R, W& M5 a, _: \! S
我们试试多处理一段时间 看看效果