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楼主: zhenhuale
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【请教】 请问CIK培养时换液的依据   [复制链接]

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发表于 2012-7-6 16:14 |只看该作者
回复 113305060 的帖子6 }, H; A# B+ ?  F* @& N
0 U: L( ]9 k& M) c3 U! k) R# R* n
最后是在培养袋中培养的,可以装1600-2000ml培养基呢。
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发表于 2012-7-6 16:15 |只看该作者
培养过程中不换液,一般2-3天等量补液,不过这也要根据细胞的生长具体情况来定,我是一般看到培养基颜色明显变黄,镜下形成较多细胞团就补液了,除了第2天补充各种细胞因子外,我们培养后期的补液都是补含有IL-2的完全培养基(含双抗,FBS的1640).
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发表于 2012-7-6 16:38 |只看该作者
培养过程中不换液,一般2-3天等量补液,不过这也要根据细胞的生长具体情况来定,我是一般看到培养基颜色明显变黄,镜下形成较多细胞团就补液了,除了第2天补充各种细胞因子外,我们培养后期的补液都是补含有IL-2的完全培养基(含双抗,FBS的1640).

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发表于 2012-7-6 16:40 |只看该作者
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培养过程中不换液,一般2-3天等量补液,不过这也要根据细胞的生长具体情况来定,我是一般看到培养基颜色明显变黄,镜下形成较多细胞团就补液了,除了第2天补充各种细胞因子外,我们培养后期的补液都是补含有IL-2的完全培养基(含双抗,FBS的1640).

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发表于 2012-7-9 16:04 |只看该作者
细胞状态不好就半量换液,这样有利于细胞形成集落形成。我试过半量换液跟补液,感觉补液没有半量换液的细胞状态好。
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发表于 2012-7-9 16:52 |只看该作者
回复 jiefengbing 的帖子
+ G+ m) F" h. z9 @8 m
4 Z& V: R$ E/ L8 n, ~0 |CIK换液是不是离心后半换液啊?
% y1 \# L* W) p: Z+ t3 I5 j8 E& uDC细胞在后期培养中也是悬浮状态的,是不是也是离心后半换液?谢谢
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发表于 2012-7-9 17:50 |只看该作者
回复 113305060 的帖子7 w) u; z2 ?$ z5 |9 v) I1 t. V* Y

! o* z$ `, ]" i( D* x$ w我是离心后半量换液的,DC第7天跟CIK混在一起了,前期就按照贴壁细胞换液方法就行了
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发表于 2012-7-11 10:22 |只看该作者
补液只需加IL-2,IFN和CD3不需要再补加,细胞密度很大的时候,比如3*106/ml的时候需要扩瓶或转到培养袋中培养啦,CIK细胞增殖很快的。在细胞生长期,每次补液的时候密度调到1*106/ml。
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发表于 2012-8-15 11:05 |只看该作者
回复 113305060 的帖子8 p  ]2 K+ F5 W" C0 Q2 u
5 o7 R4 X. i3 Y5 q1 n. c
最后培养液就是很多
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