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[讨论] 免疫荧光 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-6-11 16:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
用24孔板直接做免疫荧光时,最后一步多用甘油封片,我想直接上机看,不用甘油封片可以吗?还有就是不用甘油封片时会有水滴存在,导致镜下折光很强,我想风干一会儿再上机,这样可行吗?会对细胞荧光损伤吗?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-6-11 16:32 |只看该作者
我觉得没啥问题,我几乎没用过甘油封片,洗完DAPI就泡在PBS里直接镜检,感觉不出来有啥不好...
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藤椅
发表于 2012-6-11 17:28 |只看该作者
LZ用甘油是最好的选择  为什么不用  
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板凳
发表于 2012-6-11 17:38 |只看该作者
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50%PBS+50%甘油高压灭菌,- R, `# N/ K2 n) w6 x- r
或用抗衰减封片剂(贵点)# u  \/ o& s# a, Z: w+ H8 I

) W* q! c# v7 B% H  u5 N, V* O观察好不好的,我还真没注意,但有这个可以延缓荧光淬灭时间,而起封片后也有个保护的作用
( \* p- z5 D7 Q5 f# g- h而且免疫荧光,最后要拿好的图,应该会上高倍镜(油镜)什么的,你不封不太好吧5 E, I0 P% R; P: C
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报纸
发表于 2012-6-13 09:39 |只看该作者
甘油封片是为了长期保存,但是甘油封片很麻烦,有时操作不好的话也影响观察。我们实验室都是不封片直接观察的
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地板
发表于 2012-6-17 10:35 |只看该作者
应该不会对小抱有太多影响!观察效果会有一定影响!
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发表于 2012-6-18 15:43 |只看该作者
甘油封片有时候会使得视野模糊,一般暂时封片时用,荧光会衰退,个人认为没有必要封片长期保存,长期保存用中性树胶
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发表于 2012-6-18 15:56 |只看该作者
买个碧云天的抗淬灭剂最好,放到4度一星期内照都可以
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