人骨髓间充质干细胞 铺24孔板难题。。。附操作步骤。。。求解求救

fengxiwu

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你写的很详细-----学习了。你的最终浓度msc24孔板1万细胞？   msc的大小你测算过吗。我的估值在100-150微米的长度。细胞核多是椭圆型，核仁1--3个，平时冻存，除非是几个培养瓶中的集中到一起----密度不过几十万每毫升。六孔板100%融合也很难达到10的5次方msc细胞。普通培养瓶也就是10的5次方，最多三二十万的细胞量。; P$ M2 [( I8 Y/ j
1.感觉msc细胞很容易重悬，很少遇到msc细胞团的情况（细胞正在分裂，藕断丝连的情况除外）。倒是白血病骨髓分离的单个核细胞在细胞量特别大的情况时，不论是冻存与否，成为粘性细胞团不能吹散------15次遇到过两次（随培养时间的延长，自动又分散开了，但是培养结果不好）。4 {0 B6 I, E3 i8 h1 O+ I, V& ^
2.msc的消化确实很容易，室温下有时也很快的。细胞皱缩之后，一拍打就全都悬浮起来了。但是也确实遇到过胰酶消化不理想的时候。不知是否同细胞状态有关------老化？分化？还是生长时间太长未处理以及胰酶或者pbs冲洗不充分的原因。？
- E- G3 J; h3 [' k3 w+ N3.孔板中培养经常遇到的是不均匀的情况，中央密集周边稀疏，也有周边比中央 密集的时候。各个孔中密度不均匀自然是同母液的处理有关了。; n3 L+ U/ z% R9 h3 l: l# A3 C
    很多文章中涉及msc的，不论是冻存还是传代、培养，密度在10的6次方的，真不知道人家的细胞同咱们的为什么就差别这么大------真实点就这么难。弄的人心惶惶

细胞海洋

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pengxuleo

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6 a! ]! ]+ v; ~! j9 u”普通培养瓶也就是10的5次方，最多三二十万的细胞量“ -----这是T-25吧，一般样MSC都用T-75，T-175,还有更大的培养瓶。