请教高手: IPS诱导?

daytoday

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& _( o3 u, M) Z  q* m# s
) \/ H& I& N7 u3 w这是35mm的dish

ghfvcat

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* g, s8 L) K; m; s/ }- a
! u2 V% N& y( M0 I" |iPS诱导效率99%以上? are you joking?

birdflubirdflu

回复 晴朗 的帖子
1 K+ T3 J* Y- Z- a- b5 d7 g+ H, ^6 ]6 P7 N! Y$ [- N7 `6 [
能少用transcription factor还是少用了，毕竟大家都在优化，寻找一个最好的cocktail。

daytoday

回复 ghfvcat 的帖子& N& M; V' P3 V$ [( b8 M

" f8 e* q2 ~( c% oI'm dead serious

birdflubirdflu

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( G  ^0 b1 U& n) k- Q$ j" Y, ^0 Q1 J1 W4 ~3 H5 J) u3 q
我明白。 因为你算的是最终ips除以最初被诱导细胞的总数，而这个conversion的过程，细胞是增长的。有可能一个fibroblast诱导成了两个ips。很多group都是这样算conversion efficiency的，见怪不怪的，超过100%的conversion efficiency都有。

ghfvcat

回复 birdflubirdflu 的帖子$ f0 {1 Q9 u) z* q7 b) l
2 I, N8 M. y0 C" h7 l
效率不应该是最后形成的克隆数目除以铺在feeder上的原始细胞的数目么，这个算什么效率？多让iPS长个两天，这个效率可以翻几番吧

birdflubirdflu

回复 ghfvcat 的帖子: E0 T% f, Z3 R' x7 Q7 N

# o; M. i% d2 D+ B+ q你说的是正确的，但conversion的过程细胞会增长也是一个事实，重编程的完成时间点是人为定的，我们只是遵循计算的原则，所以克隆数目的多少在一定程度上也是可变的。

daytoday

我们是计数重编程之后ips细胞的阳性细胞数与最终总细胞数的比例
$ R+ c1 j4 }1 [1 |6 C* f  j我们不使用feeder

xiphias

回复 daytoday 的帖子; y5 t" F% j  Q: z7 a' U5 `
( J' K) D- z6 P! ]
牛啊。用蛋白做的，可以透露下你们是那个实验室吗？ 用的Cell stem Cell文章的条件吗

daytoday

回复 xiphias 的帖子" a8 H" i% Q4 n4 W% O" _
( T& G/ Q- n0 z6 Q" w. }# d
美国密西根州一个不起眼的实验室，华人老板，他做了20年的蛋白结构
+ d$ E" h: m2 M% Y6 f/ z* K- Q只用SOX2，oct4和Nanog，诱导5天后撤掉蛋白