我最近一直在诱导分化MSCs，诱导成骨分化成功，可是为何我诱导成脂细胞不成功呢

634996425

回复 luckywen 的帖子  U% d; A4 ?6 j2 o, e% Y
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我在配制诱导剂时，脂溶的我用DMSO,水溶的用超纯水。应该每问题。胰岛素我用水溶解的 4 W+ W4 d" r. m/ L7 W

thomassun2008

回复 634996425 的帖子2 {2 b1 S  b* Y% E0 t* e3 O

6 o4 c4 L8 ?3 x" i3 f能说一下你的细胞是什么来源的吗？我的是脐带的，成脂率70%。但是我的成骨没做出来。我严重怀疑是细胞来源导致分化能力不太一样了。

bin

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1 F3 F- d: V2 @1 v8 f' J
! |4 J9 F7 c9 k0 b: V; p8 b/ ?我以前做过MSC向脂肪诱导，这个很容易的，按照文献做肯定能做出来。你写得有点乱，我都没有看明白你想说明什么问题，成脂诱导成功时不需要染色就可以看到细胞中有许多脂肪颗粒，但是绝对不会飘起来的。如果诱导21天还没有看到脂肪颗粒，说明你的方法有问题，可能原因是诱导剂配错了，或者诱导剂失效，尤其是胰岛素，一定要放在-20度保存，而且避免反复冻融，我以前就又一次胰岛素失效，有很多细胞都死了。在明视野中能看到脂肪颗粒的时候染油红O，不要用有机溶剂固定细胞，脂肪会被溶解的，用4%甲醛比较好。

havie

我曾经诱导脐带MSC成脂分化，使用了地晒米松、异丁基甲基黄嘌呤、吲哚美辛共同作用，成功诱导出脂滴，但成脂率40%-50%。

chichao0000

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/ B8 e# j2 i1 S回复 634996425 的帖子  S# }( u& W, O) i
( r$ _5 d6 D, a! @3 W( z
胰岛素易溶于水吗？我们用的胰岛素是液体的（sigma,最近网上好像没货了)；
" c" h- P/ e0 M: p: x* F另外，我们的吲哚用的200uM；4 O8 g  o, M6 t& |/ w
对于大鼠来源的脂肪干细胞一般7-8天诱导的就很好了(我们是持续用诱导培养基），可以染色（一般诱导一周左右我会每天光镜下观察细胞内脂滴形成情况，一旦有成熟脂肪细胞要脱落，停止诱导，4%多聚甲醛固定后，油红O染色）。希望对你有帮助。

luyue6453

回复 tjbone 的帖子( H1 Z5 L7 {, R& f, W! w2 P: g" o4 @
3 L; }7 D3 s9 {( }+ Q; Y6 G
甘油明胶封片是怎么操作？我现在刚做成脂诱导，过几天就面临染色问题了。

穿裙子的猫

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, B/ g: F7 L0 C, Q0 [不是有现成的成脂分化培养基吗，你为什么不买了试试呢