MEF细胞形态异样

nichifanlema2

+ a2 X1 k  P# A3 M+ j/ Q4 d3 Q5 R# \* L1 Y, ^% r/ v
T75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：, H, o5 u# M5 H: b/ L) }8 X
1.细胞复苏不好；
$ O, }% h7 U9 Q3 j2.传代不均匀。5 R2 n( d6 o* ]6 ^8 N% T
另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子" H0 l" a+ @3 N0 z1 ?' I
6 B+ X, }" U( S
感谢前辈指点，多谢！

runsong

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4 t; n0 \, Y4 I! M8 `别听他的。3 H9 x! [- U3 t7 a8 t+ S$ B
其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

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8 l) [% {& L) _" B4 }+ ?0 R, `; _/ U; f* S7 o
附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

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7 }; m9 p# ~& [1 w  P
6 [$ Q" h. \' m, P消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子
4 S9 A. L( M% i% b5 @9 B
1 S" A  }! n! z/ n0 U0 k如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

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! C: c; H, @( s# e! z4 ^6 Y# @& Y感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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/ Z3 }' ~/ a8 h+ y/ E  Z) l8 Q0 Z# S4 Z4 B$ M1 T; G
图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。