C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。+ a5 n1 C! }/ [9 G& \) N& a" q
+ o* O" [! p- w' Y3 Y" e, y
用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。* X2 v/ Q% g9 t7 f' q

, X& o3 W: O4 c) h: w1 O4 z# ?传代比例1：3
' `( D" Y) {9 {$ `% v+ W1 h
/ y7 M/ R9 h/ J8 S1 {原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

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6 A" m1 a) `* c* q
, N" h) z) h% k  Y2 p' j我是接在25瓶里面。' l9 [1 B5 L3 j7 F+ W  w

) c. J: d. Q" a+ _+ a* ?9 k+ ]今天试了一下1：2传。. h& b4 i2 J& K! z8 ~

0 A$ ]* i5 N5 h3 K. p0 |我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。
' p- z- C: ?/ w0 F; K" g9 A( N  O
: Y& D5 ^1 V; }/ z3 }你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

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5 F5 U4 E' a3 [, P, v, Q+ W. N4 G
ADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

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/ d! A, ?2 e6 ~5 z
7 Y6 D8 K7 v. {% a 上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

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/ f" A. `# f: O4 |2 P  _; t- v- e) @- o
遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

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, T* H+ T1 o) O* K% P/ A  Y- t% C
我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。