C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。2 m5 u% F  }  r/ S; e
& M; O0 m4 z3 w$ v
用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。5 ~! A4 P2 W1 T) i/ ?) N

- P) J1 ?/ |2 a. k" b1 s传代比例1：3/ I) ^* |# M) O& T! ]) I$ h

$ n* N* }6 p, T$ H9 P原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

回复 秋星盏 的帖子, C& I% O6 b) o1 i

! A: L, B% Q, ]' G我是接在25瓶里面。, n' M8 x1 B" `/ \$ R" Q2 g
3 @( }& n: f# V
今天试了一下1：2传。
  D% Y9 I6 {" E1 i6 B0 e% T2 q# `, X1 C( \5 I! g' w) @# a
我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。
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你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子1 s: j/ d5 Q: \
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ADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

回复 your1024 的帖子) V- S+ G/ ?9 ]& N

" O2 w' m0 R+ W 上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子- D: v# x. D2 k6 N* r1 s
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遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

回复 dj_hust1987 的帖子% u2 E4 P+ S1 f1 M! ^

! V3 d/ S  V" _& [我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。