C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。& D; @! p1 u) r
  J) u  i" g* l1 ?
用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。3 z; X3 w; Q) \, r! X2 O

. _( O; n  P, f% O! U& T, i/ x% j传代比例1：3
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; ^- u1 R! ~. n原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

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% {2 r* {2 m9 x) c1 d8 H/ W我是接在25瓶里面。
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今天试了一下1：2传。. b/ y8 `8 U! I0 B( H
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我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。' m8 A! h/ |' d& A1 @9 H- s& ~$ q7 z# j
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你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

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' X/ a8 a" I/ m% N3 v" mADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

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2 k+ u. Y+ N  Q5 V. h0 Z, I" Q 上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

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遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

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" E, r& }+ d- G1 g8 j
6 s- |" J8 W. k. q我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。