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C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-7 18:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原来培养和大多数培养过程一致,1型胶原酶震荡消化1h,离心取沉淀部分重悬,种植。7 w- R/ s5 n/ y5 M* l9 k3 U- g

& N0 R. u, d4 \, h- d: W用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。1 T, H9 V' ^4 U0 z9 e6 M4 K

+ l" T( {) S- s/ W3 n$ ?" w传代比例1:3
$ x7 N# k# G- z  ?7 w3 y) Z1 `) h% u5 a$ I' ]0 ^
原代细胞长得很好,状态也很好,传代之后不见增长。什么原因?
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沙发
发表于 2012-7-8 09:11 |只看该作者
我用的是低糖的DMEM,你接种在怎样的孔板里的呢?还是培养瓶,长不快和细胞密度有关系的,接种面积可以小一些的,传代可以尝试1:2,虽然我的间质干是疯长的,我也纳闷呢。
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藤椅
发表于 2012-7-8 11:00 |只看该作者
回复 秋星盏 的帖子
/ }, T" n1 i+ q+ V
. b  `& A0 b. A4 j3 r& h( l+ l我是接在25瓶里面。6 C, B7 k5 W# l9 Q' N9 r2 V

, V- z- c* {2 T$ o: m今天试了一下1:2传。
: b! X8 Q, ~# R( r2 F6 ?- k" F. G8 D: t. B" Y+ C2 m
我同学也是做这个的,他说1:3传代后,一般3天又长满了。% {& A# z; b9 G

2 T/ W& z3 i) K! {0 M你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊?
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板凳
发表于 2012-7-10 13:45 |只看该作者
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回复 dj_hust1987 的帖子8 {- X2 c, S. d" C) x. w
( g9 y* _2 v! {
ADSC疯起来一传四,一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的,当然代次不能太高,到六代左右估计也就差不多了。
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报纸
发表于 2012-7-11 08:11 |只看该作者
回复 your1024 的帖子
0 R# X: H3 c7 Y( F8 q" N2 M( Z' [
3 e/ B1 b' E  X9 M 上次传代已经有3天了,1:2传的,结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。
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地板
发表于 2012-7-11 09:52 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子) e+ X. ?1 K  z0 J0 n* r, T8 Q* N

6 `1 n* o5 G: ^  U7 ]遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了,检验一下操作步骤吧。对,上个图片是挺能说明问题的。
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发表于 2012-7-13 22:37 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
. v, ~" U1 ]+ K; B$ T' E+ U& l
/ r$ r" L1 X6 {; X我的疯长的间质干今天上流式了,结果很不理想!只有CD29阳性率高,其它都20%左右,很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪,我QQ是710264675,能否详细探讨一下呀。
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