C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。
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6 ]% y0 W% l1 G用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。- ^/ H- f) b, v! ~
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传代比例1：3- ~$ X# Q+ G. e* V5 V  b( M- ?
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原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

回复 秋星盏 的帖子# `# h0 ?' t5 w% N. v. u% d
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我是接在25瓶里面。
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今天试了一下1：2传。4 O  ^# y) b8 T9 E7 t6 I
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我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。8 V% `# h3 k0 ?. U8 }
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你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

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& Z+ w+ h# e8 y' _( f8 V: V# xADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

回复 your1024 的帖子" Q' F9 R, `$ B& t" c  Y
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上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子% h1 n8 y$ N+ {' Q# |
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遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

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  w" w/ `/ y. v. T我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。