C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。
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! K4 q; c5 q3 y5 _, P4 }用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。9 Y- J0 O) r0 S' B( C1 E3 u

% k0 F; a" p$ k! Z8 C& b6 V- d传代比例1：3# Y8 r+ h$ d& `& i9 @6 Z, _9 J' [' f

' R' q/ E2 S) L# L7 `原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

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' s7 }, a& c  [: ?( v我是接在25瓶里面。
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今天试了一下1：2传。
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7 Q6 ^. i, m9 }- x$ Q我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。
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5 i1 u8 p+ L( C你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

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. j, A) Q/ q. R. L! r9 k0 j. Y2 m
ADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

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8 u" k- P, N0 E1 z6 z+ y5 U7 D 上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

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6 Y; c6 q/ m$ V7 F
$ h: d9 T; s% V9 a遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

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& H  y, Q' f% _( Y% R( Q3 w( X. |$ @7 L
我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。