C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。
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用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。7 E" Z3 c# y7 s+ |. {0 J

! r( v$ ~' O" _+ r传代比例1：31 j/ D/ D- s3 [0 L2 F) @2 v* d
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原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

回复 秋星盏 的帖子) t7 S- |' e0 O0 T1 E4 e2 \8 T/ U: \

) _' C$ N) P" x我是接在25瓶里面。
1 ?) E6 c# j* s, D7 S3 |: [1 }. V( W/ A, [4 [  E
今天试了一下1：2传。7 e4 v+ p' v' ~. S; V, M0 L3 R
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我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。) J7 ~+ c1 X( ]- g+ ?- ]& U# ?

1 U9 n* T: r" [9 F6 @你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子9 ]7 ?9 Y. [/ h- k0 c9 R. g) J

6 |# T5 ?& o' [/ Z1 e  EADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

回复 your1024 的帖子; U* a* a5 \" s* Q& c: m; a
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上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子* h& z! J% x9 a& ~8 m7 p
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遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

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0 T0 O4 h: p/ K( C; C) w& c
7 u% t# ?/ C  E+ J7 ?+ D' ?, _我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。