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C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-7 18:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原来培养和大多数培养过程一致,1型胶原酶震荡消化1h,离心取沉淀部分重悬,种植。
' {# N" f" {: B. b' m2 B2 f* Q  h, P# l' }5 F4 Z
用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。( D! Y, R  v9 K
% C- s, X5 g# a% j
传代比例1:3
" F. m- X" h+ W" N8 c$ m' ^9 v# ]$ j# I9 O" J
原代细胞长得很好,状态也很好,传代之后不见增长。什么原因?
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沙发
发表于 2012-7-8 09:11 |只看该作者
我用的是低糖的DMEM,你接种在怎样的孔板里的呢?还是培养瓶,长不快和细胞密度有关系的,接种面积可以小一些的,传代可以尝试1:2,虽然我的间质干是疯长的,我也纳闷呢。
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藤椅
发表于 2012-7-8 11:00 |只看该作者
回复 秋星盏 的帖子
! ]$ [: m- A1 Q4 n3 _8 o7 P0 [
0 u  h2 U( z& A我是接在25瓶里面。
- M) W8 ~9 X9 J3 P( d2 B6 p
1 ]/ b/ {% s6 c今天试了一下1:2传。
2 z% Q9 ~% Z7 d3 a5 G& e  n" C" R4 ^5 F5 W5 @% v! {$ o8 P$ k
我同学也是做这个的,他说1:3传代后,一般3天又长满了。* o; t4 H& \/ @0 `  T. \* ]9 @0 e
1 k6 f9 h  t3 W6 y' p" B( C
你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊?
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发表于 2012-7-10 13:45 |只看该作者
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回复 dj_hust1987 的帖子
' d& U( m4 T- w6 Y0 K8 z1 p
: {7 M- v1 p9 _" B+ zADSC疯起来一传四,一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的,当然代次不能太高,到六代左右估计也就差不多了。
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发表于 2012-7-11 08:11 |只看该作者
回复 your1024 的帖子
7 j- {! m% n- ^) l2 A$ [8 ^+ v, y5 H5 N
上次传代已经有3天了,1:2传的,结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。
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发表于 2012-7-11 09:52 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子6 h( D2 B; u( q: C: Q6 R7 i7 r& _
" b+ q0 ^9 u' X  r
遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了,检验一下操作步骤吧。对,上个图片是挺能说明问题的。
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发表于 2012-7-13 22:37 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子: @& O" }) S. {  E& f4 z2 l
( u  k. t0 j! [$ U6 `0 r
我的疯长的间质干今天上流式了,结果很不理想!只有CD29阳性率高,其它都20%左右,很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪,我QQ是710264675,能否详细探讨一下呀。
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