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C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-7 18:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原来培养和大多数培养过程一致,1型胶原酶震荡消化1h,离心取沉淀部分重悬,种植。
1 e) ^# ?, l1 i' c' _
! K4 q; c5 q3 y5 _, P4 }用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。9 Y- J0 O) r0 S' B( C1 E3 u

% k0 F; a" p$ k! Z8 C& b6 V- d传代比例1:3# Y8 r+ h$ d& `& i9 @6 Z, _9 J' [' f

' R' q/ E2 S) L# L7 `原代细胞长得很好,状态也很好,传代之后不见增长。什么原因?
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沙发
发表于 2012-7-8 09:11 |只看该作者
我用的是低糖的DMEM,你接种在怎样的孔板里的呢?还是培养瓶,长不快和细胞密度有关系的,接种面积可以小一些的,传代可以尝试1:2,虽然我的间质干是疯长的,我也纳闷呢。
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藤椅
发表于 2012-7-8 11:00 |只看该作者
回复 秋星盏 的帖子
* |  U* t, H- @; Z. d$ z$ W5 _
' s7 }, a& c  [: ?( v我是接在25瓶里面。
, Z6 d; L1 G! U; E& Y5 q( R0 c! {$ f9 u( U9 D
今天试了一下1:2传。
$ f, N: c( [4 x9 J; {+ S
7 Q6 ^. i, m9 }- x$ Q我同学也是做这个的,他说1:3传代后,一般3天又长满了。
7 {4 Y  w0 w/ D) Q$ Q" K8 l
5 i1 u8 p+ L( C你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊?
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板凳
发表于 2012-7-10 13:45 |只看该作者
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回复 dj_hust1987 的帖子; Q  F  f# X* K$ g: e# F
. j, A) Q/ q. R. L! r9 k0 j. Y2 m
ADSC疯起来一传四,一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的,当然代次不能太高,到六代左右估计也就差不多了。
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报纸
发表于 2012-7-11 08:11 |只看该作者
回复 your1024 的帖子& O# ]. K" b+ Z

8 u" k- P, N0 E1 z6 z+ y5 U7 D 上次传代已经有3天了,1:2传的,结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。
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地板
发表于 2012-7-11 09:52 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
6 Y; c6 q/ m$ V7 F
$ h: d9 T; s% V9 a遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了,检验一下操作步骤吧。对,上个图片是挺能说明问题的。
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发表于 2012-7-13 22:37 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
& H  y, Q' f% _( Y% R( Q3 w( X. |$ @7 L
我的疯长的间质干今天上流式了,结果很不理想!只有CD29阳性率高,其它都20%左右,很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪,我QQ是710264675,能否详细探讨一下呀。
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