C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。
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用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。( D! Y, R  v9 K
% C- s, X5 g# a% j
传代比例1：3
" F. m- X" h+ W" N8 c$ m' ^9 v# ]$ j# I9 O" J
原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

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! ]$ [: m- A1 Q4 n3 _8 o7 P0 [
0 u  h2 U( z& A我是接在25瓶里面。
- M) W8 ~9 X9 J3 P( d2 B6 p
1 ]/ b/ {% s6 c今天试了一下1：2传。
2 z% Q9 ~% Z7 d3 a5 G& e  n" C" R4 ^5 F5 W5 @% v! {$ o8 P$ k
我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。* o; t4 H& \/ @0 `  T. \* ]9 @0 e
1 k6 f9 h  t3 W6 y' p" B( C
你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

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' d& U( m4 T- w6 Y0 K8 z1 p
: {7 M- v1 p9 _" B+ zADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

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7 j- {! m% n- ^) l2 A$ [8 ^+ v, y5 H5 N
上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子6 h( D2 B; u( q: C: Q6 R7 i7 r& _
" b+ q0 ^9 u' X  r
遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

回复 dj_hust1987 的帖子: @& O" }) S. {  E& f4 z2 l
( u  k. t0 j! [$ U6 `0 r
我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。