C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显？

dj_hust1987

原来培养和大多数培养过程一致，1型胶原酶震荡消化1h，离心取沉淀部分重悬，种植。7 w- R/ s5 n/ y5 M* l9 k3 U- g

& N0 R. u, d4 \, h- d: W用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。1 T, H9 V' ^4 U0 z9 e6 M4 K

+ l" T( {) S- s/ W3 n$ ?" w传代比例1：3
$ x7 N# k# G- z  ?7 w3 y) Z1 `) h% u5 a$ I' ]0 ^
原代细胞长得很好，状态也很好，传代之后不见增长。什么原因？

秋星盏

我用的是低糖的DMEM，你接种在怎样的孔板里的呢？还是培养瓶，长不快和细胞密度有关系的，接种面积可以小一些的，传代可以尝试1:2，虽然我的间质干是疯长的，我也纳闷呢。

dj_hust1987

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/ }, T" n1 i+ q+ V
. b  `& A0 b. A4 j3 r& h( l+ l我是接在25瓶里面。6 C, B7 k5 W# l9 Q' N9 r2 V

, V- z- c* {2 T$ o: m今天试了一下1：2传。
: b! X8 Q, ~# R( r2 F6 ?- k" F. G8 D: t. B" Y+ C2 m
我同学也是做这个的，他说1:3传代后，一般3天又长满了。% {& A# z; b9 G

2 T/ W& z3 i) K! {0 M你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊？

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子8 {- X2 c, S. d" C) x. w
( g9 y* _2 v! {
ADSC疯起来一传四，一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的，当然代次不能太高，到六代左右估计也就差不多了。

dj_hust1987

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0 R# X: H3 c7 Y( F8 q" N2 M( Z' [
3 e/ B1 b' E  X9 M 上次传代已经有3天了，1：2传的，结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。

your1024

回复 dj_hust1987 的帖子) e+ X. ?1 K  z0 J0 n* r, T8 Q* N

6 `1 n* o5 G: ^  U7 ]遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了，检验一下操作步骤吧。对，上个图片是挺能说明问题的。

秋星盏

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. v, ~" U1 ]+ K; B$ T' E+ U& l
/ r$ r" L1 X6 {; X我的疯长的间质干今天上流式了，结果很不理想！只有CD29阳性率高，其它都20%左右，很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪，我QQ是710264675，能否详细探讨一下呀。