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C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-7 18:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原来培养和大多数培养过程一致,1型胶原酶震荡消化1h,离心取沉淀部分重悬,种植。
2 \; o! E- `% }1 c6 _4 I5 N8 N* e: U# c6 b
用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。7 E" Z3 c# y7 s+ |. {0 J

! r( v$ ~' O" _+ r传代比例1:31 j/ D/ D- s3 [0 L2 F) @2 v* d
8 b2 _$ o, F  m# A  K
原代细胞长得很好,状态也很好,传代之后不见增长。什么原因?
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沙发
发表于 2012-7-8 09:11 |只看该作者
我用的是低糖的DMEM,你接种在怎样的孔板里的呢?还是培养瓶,长不快和细胞密度有关系的,接种面积可以小一些的,传代可以尝试1:2,虽然我的间质干是疯长的,我也纳闷呢。
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藤椅
发表于 2012-7-8 11:00 |只看该作者
回复 秋星盏 的帖子) t7 S- |' e0 O0 T1 E4 e2 \8 T/ U: \

) _' C$ N) P" x我是接在25瓶里面。
1 ?) E6 c# j* s, D7 S3 |: [1 }. V( W/ A, [4 [  E
今天试了一下1:2传。7 e4 v+ p' v' ~. S; V, M0 L3 R
% ?* e$ t  |# r" V
我同学也是做这个的,他说1:3传代后,一般3天又长满了。) J7 ~+ c1 X( ]- g+ ?- ]& U# ?

1 U9 n* T: r" [9 F6 @你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊?
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板凳
发表于 2012-7-10 13:45 |只看该作者
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回复 dj_hust1987 的帖子9 ]7 ?9 Y. [/ h- k0 c9 R. g) J

6 |# T5 ?& o' [/ Z1 e  EADSC疯起来一传四,一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的,当然代次不能太高,到六代左右估计也就差不多了。
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发表于 2012-7-11 08:11 |只看该作者
回复 your1024 的帖子; U* a* a5 \" s* Q& c: m; a
+ P2 t* V0 G# r5 I" m9 U
上次传代已经有3天了,1:2传的,结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。
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发表于 2012-7-11 09:52 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子* h& z! J% x9 a& ~8 m7 p
/ n) h* E' p; O1 @
遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了,检验一下操作步骤吧。对,上个图片是挺能说明问题的。
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发表于 2012-7-13 22:37 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
0 T0 O4 h: p/ K( C; C) w& c
7 u% t# ?/ C  E+ J7 ?+ D' ?, _我的疯长的间质干今天上流式了,结果很不理想!只有CD29阳性率高,其它都20%左右,很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪,我QQ是710264675,能否详细探讨一下呀。
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