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C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-7 18:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原来培养和大多数培养过程一致,1型胶原酶震荡消化1h,离心取沉淀部分重悬,种植。
% L% F# `/ w+ k% _! w
6 ]% y0 W% l1 G用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。- ^/ H- f) b, v! ~
; R/ v7 k! M2 D4 e& o
传代比例1:3- ~$ X# Q+ G. e* V5 V  b( M- ?
. T$ S8 @$ W. ~) X+ N% ~
原代细胞长得很好,状态也很好,传代之后不见增长。什么原因?
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沙发
发表于 2012-7-8 09:11 |只看该作者
我用的是低糖的DMEM,你接种在怎样的孔板里的呢?还是培养瓶,长不快和细胞密度有关系的,接种面积可以小一些的,传代可以尝试1:2,虽然我的间质干是疯长的,我也纳闷呢。
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藤椅
发表于 2012-7-8 11:00 |只看该作者
回复 秋星盏 的帖子# `# h0 ?' t5 w% N. v. u% d
, p" K/ S2 c1 M  z6 E$ J& ^! v; i; h
我是接在25瓶里面。
& f$ B2 D: ?3 ^2 ]/ Y! L$ e$ P5 w1 g: _
今天试了一下1:2传。4 O  ^# y) b8 T9 E7 t6 I
9 K2 H! O* J5 `( J4 H) S
我同学也是做这个的,他说1:3传代后,一般3天又长满了。8 V% `# h3 k0 ?. U8 }
& q- ?7 p& d' K3 U% }+ Q6 c
你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊?
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板凳
发表于 2012-7-10 13:45 |只看该作者
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回复 dj_hust1987 的帖子* T! y7 i4 A, B. r- ?1 R7 C8 {7 k

& Z+ w+ h# e8 y' _( f8 V: V# xADSC疯起来一传四,一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的,当然代次不能太高,到六代左右估计也就差不多了。
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报纸
发表于 2012-7-11 08:11 |只看该作者
回复 your1024 的帖子" Q' F9 R, `$ B& t" c  Y
! g4 M7 }$ w8 ^% A% d6 Y( z, ]
上次传代已经有3天了,1:2传的,结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。
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地板
发表于 2012-7-11 09:52 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子% h1 n8 y$ N+ {' Q# |
5 ^0 y( @% n+ p0 h( U) `
遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了,检验一下操作步骤吧。对,上个图片是挺能说明问题的。
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发表于 2012-7-13 22:37 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
% p. ^4 N" Q8 T
  w" w/ `/ y. v. T我的疯长的间质干今天上流式了,结果很不理想!只有CD29阳性率高,其它都20%左右,很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪,我QQ是710264675,能否详细探讨一下呀。
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