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C57X小鼠脂肪干细胞培养传代后怎么增殖不明显? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-7 18:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原来培养和大多数培养过程一致,1型胶原酶震荡消化1h,离心取沉淀部分重悬,种植。& D; @! p1 u) r
  J) u  i" g* l1 ?
用的培养基 高糖DMEM+10%胎牛血清。3 z; X3 w; Q) \, r! X2 O

. _( O; n  P, f% O! U& T, i/ x% j传代比例1:3
! Q& d- Y1 g1 ?( a3 i
; ^- u1 R! ~. n原代细胞长得很好,状态也很好,传代之后不见增长。什么原因?
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沙发
发表于 2012-7-8 09:11 |只看该作者
我用的是低糖的DMEM,你接种在怎样的孔板里的呢?还是培养瓶,长不快和细胞密度有关系的,接种面积可以小一些的,传代可以尝试1:2,虽然我的间质干是疯长的,我也纳闷呢。
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藤椅
发表于 2012-7-8 11:00 |只看该作者
回复 秋星盏 的帖子. I* x5 p* Z* [# y) n+ d

% {2 r* {2 m9 x) c1 d8 H/ W我是接在25瓶里面。
" A+ C$ U" E; H6 e, l% ^% [1 x0 }, z4 G% A7 \
今天试了一下1:2传。. b/ y8 `8 U! I0 B( H
; W$ K& J8 G) h% I# `. h8 d
我同学也是做这个的,他说1:3传代后,一般3天又长满了。' m8 A! h/ |' d& A1 @9 H- s& ~$ q7 z# j
$ {4 M7 g: X& S0 D$ `
你的细胞原代和传代后形态有没有变化啊?
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板凳
发表于 2012-7-10 13:45 |只看该作者
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回复 dj_hust1987 的帖子" d& |1 j& S) o

' X/ a8 a" I/ m% N3 v" mADSC疯起来一传四,一传五都没有问题的。理论上讲应该越长越好看的,当然代次不能太高,到六代左右估计也就差不多了。
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报纸
发表于 2012-7-11 08:11 |只看该作者
回复 your1024 的帖子
3 @1 A+ p7 E% V' k& A- ?/ m
2 k+ u. Y+ N  Q5 V. h0 Z, I" Q 上次传代已经有3天了,1:2传的,结果今天还是没怎么长。。。我怀疑不是脂肪干细胞。。。改天上个图片帮忙看看。。。
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地板
发表于 2012-7-11 09:52 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
  |2 Z3 j9 z7 Z+ `8 v* D# x' v" a! I- n
遇到这种情况估计就是操作上可能出现问题了,检验一下操作步骤吧。对,上个图片是挺能说明问题的。
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发表于 2012-7-13 22:37 |只看该作者
回复 dj_hust1987 的帖子
" E, r& }+ d- G1 g8 j
6 s- |" J8 W. k. q我的疯长的间质干今天上流式了,结果很不理想!只有CD29阳性率高,其它都20%左右,很郁闷。我也是分得C57小鼠的脂肪,我QQ是710264675,能否详细探讨一下呀。
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