干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 71057|回复: 11
go

没加任何诱导剂,培养瓶里有脂滴出现了~~求解 [复制链接]

Rank: 2

积分
283 
威望
283  
包包
513  

优秀会员

楼主
发表于 2012-7-10 01:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
本帖最后由 相宜 于 2012-7-10 01:06 编辑 8 d# t6 g$ O, ?# w7 U
% \, i- x" O6 E* {4 t( I  l
最近5天没有换液,400x镜下看有空泡状团簇状出现的,貌似小脂滴,请各位大侠说说什么原因造成的自己分化呢?这些是脂滴吗?$ R8 Y9 S2 i% G) K( K1 @( N& ~" ?
接下来的油红O染色请各位大侠给点详细的建议和步骤~~或者有文献也行~~
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
283 
威望
283  
包包
513  

优秀会员

沙发
发表于 2012-7-10 01:40 |只看该作者
我还想让这个细胞进一步往脂肪细胞上面分化接下来该怎么做呢?

Rank: 3Rank: 3

积分
455 
威望
455  
包包
463  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-7-10 08:48 |只看该作者
可以做成脂诱导:配方如下:Low-DMEM,10%FBS,0.5mM IBMX,10ug/ML 胰岛素,10-6M 地塞米松,100uM 吲哚美辛
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
455 
威望
455  
包包
463  

金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2012-7-10 08:52 |只看该作者
油红O染色:染色液配制:油红O干粉0.8g溶于20ml异丙醇,充分溶解,避光,室温放置,为储存液。使用前过滤。使用时储液:双蒸水=3:2,即为工作液。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
455 
威望
455  
包包
463  

金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2012-7-10 08:55 |只看该作者
染色步骤:去掉培养基-----PBS漂洗两次------4%多聚甲醛固定30分钟-----去掉固定液,PBS漂洗两次------加入油红O工作液10分钟-------去掉染色液,PBS漂洗两次--------镜检,拍照
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
196 
威望
196  
包包
818  

优秀会员

地板
发表于 2012-7-10 13:39 |只看该作者
回复 相宜 的帖子9 H. T7 p, P2 }" B# R

: b. ?8 `9 a# s" J我记得楼主您取得是脂肪细胞吧?这个出现油滴也算是比较正常的吧,毕竟那就是油啊,不过5天了,随着换液油滴应该被慢慢洗去,残留有一部分也还是可以的。诱导方面楼上说的非常清楚了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
40 
威望
40  
包包
129  
7
发表于 2012-7-11 16:32 |只看该作者
没有人为加诱导剂并不代表培养液里就没有诱导细胞分化的成分。比如血清,还有DMEM培养液。若要避免分化,建议使用血清替品等人工成分。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
134 
威望
134  
包包
557  
8
发表于 2012-7-22 20:08 |只看该作者
我有看到文献,这个好像是脂肪干细胞分化前的状态,但是不确定哈。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
24 
威望
24  
包包
300  
9
发表于 2012-7-24 14:45 |只看该作者
培养时间长,出现脂滴很正常啊,不用诱导也会自动开始分化的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
34 
威望
34  
包包
168  
10
发表于 2012-9-19 08:34 |只看该作者
脂肪干细胞出现成脂向分化不奇怪。建议以后不用养太久,以合适的密度接种后尽快进行相应方向的诱导
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-8-26 01:17

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.