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楼主: sunflower636
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培养脂肪干细胞一定要用无血清培养基吗?   [复制链接]

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发表于 2012-7-23 19:10 |只看该作者
回复 相宜 的帖子: s! b' ?" c: O9 A' ?

6 v$ ?4 h, [: w' v+ o( x' {我手术取的脂肪,用加双抗的PBS洗两遍,然后剪碎,加入I型胶原酶,37度恒温摇床消化1小时,最后是消化成类似于玉米糊的样子,然后加入含血清的培养基终止消化,1000转离心10分钟,弃上清,加红细胞裂解液,室温孵育10分钟,再800转离心,一般很少看到细胞沉淀,然后加入培养基,接种。难道这其中哪个参数有问题?
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发表于 2012-7-23 21:20 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子
, \7 m7 e, T; ]# K, H/ s' @$ f# M: i& Z9 b2 T& Q4 B3 t
你要是一般很少看到细胞沉淀的话,建议你1000r之后弃上清后直接加完全培养基打散,100目滤网过滤直接种瓶子,不妨试试。
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发表于 2012-7-24 10:21 |只看该作者
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: K- v% S; o$ V! E/ O! q  {  a$ y% B" ]
好的。

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发表于 2012-7-24 14:41 |只看该作者
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试剂都用GIBCO的,肯定没啥问题,要是只是做实验用的,就加点血清吧,无血清的只是为了临床应用,而且多贵啊。。。
6 K3 H" p" q! h% P; m
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发表于 2012-8-11 16:02 |只看该作者
没有必要用无血清培养基,我们一直用的基础DMEM培养基来培养ASC,即使不添加生长因子,也可以长的很好
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发表于 2012-8-15 14:37 |只看该作者
L-DMEM  也长的很好啊,10%的血清,以前也试过无血清培养基,但是出不来
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发表于 2012-8-24 10:34 |只看该作者
无血清培养基,就要加血清替代品用来代替FBS。如果实验用,可以用FBS;若临床,则用无血清培养基。
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发表于 2017-12-29 09:20 |只看该作者
做ADSCs的培养如果不是要回输的话可以不用无血清培养基,用血清也可以,但是干细胞用无血清去培养应该会长的更好才对。一般基础培养基有用f12:的,也有用L-DMEM的,好像L-DMEM对ADSCs更适合一些。

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发表于 2018-1-9 10:09 |只看该作者
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; w% J2 F; q) z3 Z* x* y/ A/ Y* S) b6 d
你可以换个头像吗。。。。。要用个狗头做头像。。。。

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发表于 2018-2-22 10:44 |只看该作者
我用的DMEM10%FBS,原代之后发现有生长缓慢,老化的问题,是不是换成MSCM会改善呢?
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