精原干细胞的体外培养问题

daixiuliang

做精原干细胞的体外培养一般要几个睾丸？需要流式分选吗

daixiuliang

单纯用percoll 液进行梯度离心睾丸细胞然后再培养可以吗

hcluo

可以选用出生后大约6天的小鼠，10-15只左右吧；另外，建议采用Brinster提供的经典的分选方法，就是利用SSCs的特异性表达标志物Thy1做MACS分选，这样可以提高细胞分选的纯度，而且饲养起来相对要容易，这样可以尽可能的排除Sertoli 等细胞的对SSCs生长的干扰；还有，细胞培养的时候还是建议使用饲养层以及加入一些生长因子，比如LIF，GDNF等。尽心呵护啊！

w343989328

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# D; ?6 s( i/ I6 I+ g$ Xpercoll之后可以采用MACS磁珠分选，大概会分出1/10的细胞。所以说percoll梯度分离后的细胞，SSC含量还是比较少的。