大家进来帮我看看我提的PBMC图片，看看是不是PBMC,谢谢

redmaple

原胶虫污染，少的话不会对细胞造成太大影响，太多了影响细胞繁殖， 你可以扔掉了，不要考虑了。

qqgx

前段从外周血分离培养的淋巴细胞也是这样，下面铺了满满一层的类似细胞碎片的东西，经过离心后少了，但是养了两周基本不见增长，后就扔掉了。可以考虑离心时转数低一点，但前提是细胞比较多。

LL87

有一张的红细胞也太多了，细胞形态不太像啊

lyj-0017

回复 redmaple 的帖子) E* H1 D+ s% `/ {4 y8 u: ~, T9 K) b
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同意，明显是污染了，细胞状态也不对

Jonathan

你的几个倍数的照片根本不是PBMC 细胞。是碎片。$ {% w: g/ k! N+ h0 h+ _0 y
不是什么污染，而是你把真正的免疫细胞扔掉了，养的是死细胞或debris－－那些黑点.
/ T! g5 V0 ]+ T) G可以考虑分离PBMC后，注意培养液和细胞密度，我以前用100万细胞在1ml RPMI 1640 complete medium supplement with NEAA, L-glu, beta-Mercap, 后来改用50万 per ml medium. 死细胞和碎片的比例在养的过程中会减少。以便有clearer background in cell culture. 7 f8 k% X, y6 a$ y+ W- h6 B! B  h8 J

Jonathan

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另外，PBMC 不可以用TE 传代. 贴盘的现象的确是，即使是low-attachment 的盘子。建议取细胞时，可在冰上10－15分钟，细胞很更容易被吹打下来。: R$ q7 _1 l; s4 n9 v! `. G* G
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PS:   PBMC 是 Peripheral blood mononuclear cells， 红细胞不在其范围。

redmaple

在高倍镜下，你会发现它们是在旋转运动的，这种状态，你可以扔掉了。

weijunning

细胞太少了，大部分都是杂质，感觉像污染了似的。

easternliu

为什么这么多人说污染呢，郁闷了。提PBMC不用差速离心就会掺杂很多血小板和其他杂志，一般都会沉积在底部。你所需要的细胞是浮在上面的，所以贴在下面的就不用管了。不过PBMC的量太小，注意接种密度。

chenguangyu

血小板太多了