关于MTT试剂盒的最详细的解答，不懂速进，期待高人的出现！！！

相宜

我一直想做MTT测定细胞的活力绘制生长曲线，但是我前段时间买了一个MTT的粉剂，现在还没有拆封。今天找了老师问了一下，老师建议直接买试剂盒，关键是我不太明白：MTT试剂盒都是一种型号的吗，只是出产的公司不同i呢还是MTT试剂盒本身就有很多型号呢？第二：自己配置和买试剂盒都有什么区别呢？自己配置后的显色成功率是不是很低呢？老师说要先弄明白波长和CUT OFF值，波长我能理解，CUT off值怎么理解呢？脂肪干细胞的CUT off 值应该调多少呢？期待高手解答。

daviddow

碧云天的

qiuweiqin0618

MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
1 Z- Z$ N' r1 c0 Z一般自己配置使用即可，在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。实验的时候一般关闭超净台上的日光灯来避光，一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配。检测时，选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。我一般是使用双波长检测（490nm和640nm-后面这个记得不是很清楚，应该是600多nm），避免产生误差。

qiuweiqin0618

你所说的CUT OFF值应该是指背景值，可使用空白孔做对照，将所检测到的吸光度值减去背景值即可。

相宜

回复 qiuweiqin0618 的帖子, b) \) \. d. B$ ~& `
. U0 L/ }& B, G8 \# g3 E
背景值是多少呢？怎么知道背景值？

相宜

MTT自己配置和用MTT试剂盒有什么区别呢？各自的利弊都有哪些呢

qiuweiqin0618

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) d: J% h) T7 A2 n! R  }
- `# E6 `5 l: P做MTT比色法检测细胞活性，均使用96孔板。在细胞培养过程中，四周36个孔不加细胞，均用PBS填充（我一般使用30个孔填充PBS，6个孔加入培养基-与培养细胞相同的培养基，这六个孔即为空白对照孔，可得到背景值）。一般背景值很小。

相宜

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. F: I7 A: e( d  w
9 D( Q5 @$ L1 T检测细胞活性是用的MTT细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒吗？还是有其他专门检测细胞活性的试剂盒呢？

qiuweiqin0618

回复 相宜 的帖子7 t4 o# C$ }# U# e9 s& Z* x; i
4 B8 ~8 T( u3 j$ ~4 _* q- v
MTT是用于检测细胞增殖与细胞毒性，网上有介绍其他用于检测细胞活性的，具体我记得不清楚