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楼主: 米儿2003
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脐带间充质干细胞CD105表达率   [复制链接]

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发表于 2013-9-26 15:08 |只看该作者
强阳性,95-100%。
8 [8 i  {* f9 O另外要注意不同培养体系下,阳性标记物的表达程度是动态的。就是说你在A体系下获得细胞的某标记物是100%强阳表达,在B体系下可能就只有80%表达。当处于后者的情况下,一般不宜用百分率来表述。要仔细看图:是1群细胞,还是有亚群,是1个峰吗?我估计楼上的诸位其实养出的都是MSC,而且都是纯度很高的MSC。如果一定要用百分率出分析报告,建议将荧光素换成PE或APC。如果赶时间的话,那么就重新调电压,将阳性峰移出来,虽然阴性对照峰也会右移,但没有阳性的移得快,这样两峰就能分开了。
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发表于 2013-9-27 12:05 |只看该作者
我们基本上市大于95%的。如果检测的低于90%,应该要流式工程师看一下你们流式设定的方案合不合理,不行就更换一下流式方案。
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发表于 2013-11-12 16:30 |只看该作者
我们CD105的表达率一般都是95%以上,倒是我们CD73表达率不高,低的时候只有30%左右,偶尔会有80%的,不知道楼主的CD73的表达率怎么样?
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发表于 2013-11-19 15:09 |只看该作者
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我们的CD105一直都是95%以上。
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发表于 2013-11-29 15:21 |只看该作者
关于CD105 postive还是negative以及阳性率高低的问题做MSC的人应该经常遇到,以至于有时做到30%左右的阳性的时候都会怀疑是细胞不纯或抗体的问题,13年http://www.readcube.com/articles ... e.0076979?locale=en的这篇研究对于CD105+和CD105-的细胞进行研究,发现MSCs中有CD105+和CD105-两个subpopulation。并且有趣的是,CD105的阳性率会随着细胞融合的密度而下降,在30-40%融合时阳性率maximum,而当100%融合时阳性率会降到30%以下。究其原因在于细胞密度大是MMP-14表达上调,而MMP-14具有将CD105从细胞膜表面清除的作用。( l( j* b& b5 @
而在细胞的特性上,CD105-subpopulation 的MSCs更容易向脂肪和成骨诱导分化;CD105+subpopulation 则更容易向软骨分化。同时,CD105-subpopulation 可以分泌更多的TGFbata-1因此具有更好的免疫抑制作用。, T& V* a, }! U! _" t! J3 d

  m# |1 U' O! P( m
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发表于 2015-7-20 08:35 |只看该作者
流式结果有很多因素决定的,并且MSC也不能单单靠一个指标判定的,cd105在90以上应该就是可以的,至于过低,不一定是因为细胞不行,需要考虑到是取样方法 培养时间细胞老化程度 流式体系以及所使用的试剂产家、用量浓度,具体很多因素,我也就是个菜鸟,仅仅知道这些了
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发表于 2015-7-20 08:39 |只看该作者
回复 supercell 的帖子
8 y. Q7 s( f/ a, ^8 J9 ^' K( s4 s5 y# ]5 B' z1 S2 k
我也发现了,细胞生长的融合率对cd105的影响,但是没有到30%,不过的确是会降低的,现在我传细胞时密度都不敢很大了,免得检测结果并不合格,之前我也是仅仅怀疑是这个因素造成的,没想到还有一些文献的
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发表于 2015-7-20 13:14 |只看该作者
我做的差不多都达到100%,所以我认为和试剂有很大关系
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发表于 2015-7-21 10:07 |只看该作者
用的BD的
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发表于 2015-7-21 11:21 |只看该作者
我做的羊膜间充质干细胞 cd29 73 90表达都是90%以上 唯独cd105经常只有50% 左右,是不是因为细胞来源不同或者是因为cd105这个分子荧光淬灭快啊?
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