脐带间充质干细胞原代培养长梭形及周围有一个个小圆球

jennyshizz

干细胞出现了明显的老化现象，黑色颗粒的出现，还有那些透明的空泡应该有大部分是凋亡的细胞，是不是原代培养时界中密度过低了或者换液时间没有掌握好

xingyuncao

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* O6 Y9 u7 V8 J  u0 ~( G
5 a3 O. `7 p- @4 K  M% N  b换液时间该如何把握啊？谢谢

jennyshizz

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) q; |: J7 ~" P) l9 b+ m0 R  A) V" J" `1 e
我们原代养干细胞的时候首次换液时间是36h，之后是3天左右换一次，当然这个时间是我们的经验，它跟你提取细胞的质量和密度密切相关，也和培养中的营养成分有关

ditiger

这是状态不好，要老化的表现，我们传到20代以上会出现这种情况，LZ给的是p0代P1代细胞，应该是培养条件不行，建议要更换培养条件！
7 u2 {$ B2 J0 d细胞老化的标志是细胞变得扁平，折光性变差，细胞分泌物增多，增殖变慢，等等，LZ的细胞老化了。

352167963

细胞的状态不好啊   建议重新培养+ k$ M  n6 Z7 {/ ?$ B3 X

相文

多少倍照的？形态有点不对，是不是污染了？

huajie881026

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7 N! ]- p+ z, c. t
- m6 @, G7 h/ \$ b9 N. T. u请教您的培养条件是怎样的？我好想能够多传几代，但是细胞老是没传几代就老化。我用的是DMEM-LG+10%FBS（澳洲）+1%双抗，没加bFGF要紧吗？还是要用无血清的干细胞培养基，价格hold不住啊！
: s. G7 ?* p& w: p* F/ D这是P2的图，细胞状态看了真心不爽！
7 J' I  S/ o! Z/ r4 E. Y: J

ditiger

回复 huajie881026 的帖子2 U5 m) a, M7 ?) n6 F% R

$ C$ X+ [6 x/ [3 g! E( H先问一下，LZ培养的细胞做过分化鉴定么？

huajie881026

回复 ditiger 的帖子' R; r* T  u' y& V9 {5 s: Z$ H# S

" [9 T( H1 u( o  @6 l  o额 我不是LZ  我做过成脂的分化，可以诱导成脂的，成骨和成软骨还在诱导，时间没到也看不到结果。

sdwzg119

这是严重的老化啊~一直这样的话你需要改良培养基了，突然这样你要检查一下所有的东西了