knockin 和knockout 分别是来做什么的?

626630192

看文献和听报道的时候经常听到knockin 和knockout 这两者词,但是一直不知道这两种方法的具体含义和所研究的内容，求大神指教?

cellman

简单的说，knockin就是把一个外源目的基因转进细胞并整合到细胞基因组上，而knockout就是把细胞基因组上某个特定的基因删除，详细的内容可以自己在wikipedia里搜寻下。

626630192

回复 cellman 的帖子  T# w, o9 d* Y! z
8 K! J  S; f) ~" A5 P4 m1 M
里面具体过程是怎么操作的呀,我没找到具体步骤,好像和克隆不一样,求讲解啊....

xgl200

那合格操作可是复杂去了

drgaoh

; I- `- `; Q' Z+ D; F& M4 I" d( Y' h  o1 G# A0 _
回复 626630192 的帖子
) z' y& a) _/ O+ }$ x9 F  C  j- ?
  E7 }: l/ y  v9 b8 |% a5 \' r0 m知道就行了，如果你要做的话可以进行详细的研究
7 N2 O  _; ?) ^3 F+ u% F主要就是通过增强和削弱基因的表达来研究基因的作用的

lxm5668

我认为楼上“cellman” 回答的比较准确。“knockin就是把一个外源目的基因转进细胞并整合到细胞基因组上，而knockout就是把细胞基因组上某个特定的基因删除”。而不是“drgaoh”说的“通过增强和削弱基因的表达来研究基因的作用的”，这里的in和out不是增强和削弱的意思，而是“有”或“无”的作用，knockout与经常看到的“knockdown”即所谓的“敲低”不同，是用一些基因打靶等手段将基因剔除掉了。6 V% Q- N) d) U0 _
不好意思，有点较真了啊！

核糖体

l楼上说的对！

wzyhbfd

knock in一般来讲是将基因导入到细胞系或者动物体内，knock out 一般是在基因组上实现基因的删除突变，一般是移码突变。knock out现在基本上都是利用TALEN或者CRISPR/cas9的技术，无物种和基因序列的限制且特异性好。knock in 可以先利用TALEN 技术造成移码突变，再利用构建的同源模板上的点突变或者基因的替换实现基因的插入。

wzyhbfd

knock down 一般是利用shRNA来实现转录后的基因沉默(RNAi)，效率可以达到80%-90%，和knock out 的100%不表达是有本质区别。

晴斗斗

点突变应该也是knockin吧