如何能避免操作中的污染！

帝国黑骑士

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1 i8 C" X% W3 Y3 K% @" ]       在实验室操作时，有些实验步骤繁多，除了小心谨慎，还是小心谨慎，怎么样才能更好的避免污染呢！这里请大家交流一下！

safflower

是细胞培养的污染吗？
; Z3 a; n0 u7 Q& t: I7 R所有试剂沿酒精灯摆放，所有用具用前在酒精灯上过一下，保证严格的无菌操作。
0 A- i, q! R7 X# S5 p$ w  s5 K5 W学会之后，还从来没污染过，有时甚至培养基中没加双抗。

shy8610

严格遵守规定，谨慎小心，沉着冷静，注意分装和无菌不重复操作，至于酒精灯嘛，生物安全柜内不建议使用

shy8610

严格遵守规定，谨慎小心，沉着冷静，注意分装和无菌不重复操作，至于酒精灯嘛，生物安全柜内不建议使用

lazyworm

我们也不提倡用酒精灯，好多东西都是一次性的，不能过火，带了培养基的移液管也不能，产生的有毒物质对细胞不利。再说即使是玻璃的耗材能过火，但是就这样简单的过一下能杀死全部的微生物吗。培养室、培养箱定期清洁消毒，操作中严格无菌，对细胞培养来说应该就没什么问题了。其他实验应该是避免东西的交叉污染，比如说吸取不同试剂时枪头要更换。有时候碰到水都能批出东西来，这就可能是污染了。就想到这些了，总之，做实验要小心谨慎才能做好做精。

吕少阳

稳重，规范

mayanfeng

重点在于器械培养基的准备跟环境，操作对于熟练的人没什么问题

珍珠贝儿

实验前大约想一下试验操作流程，每次试验完总结下不当的操作，思考更好的流程，减少手在瓶口，培养皿口过的机会。
! s, x/ y1 l! X培养基分装成小瓶使用
! ~9 z* U8 h7 C2 [, E$ Q移液枪一定拿稳，枪头不要碰壁。; J( o; Z! ]# W2 f
尽量靠近超净台里面操作，不要再靠外面的地方操作。
6 Y" [& `& d7 L5 _' @+ [% G! I实验前深呼吸，进入注意力集中地状态，实验时最好全神贯注，别跑神等

旅行爱

学习了

旅行爱

1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 5 I8 U( e/ z2 {. |$ \
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。 % c# R! q4 @2 N3 l% [0 O& I9 U
3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。 4 G( B6 v2 ~. z4 ]
4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。 + c! o7 K) F( i7 w
5. 定期检测下列项目： 5.1. CO2 钢瓶之CO2 压力 5.2. CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。 5.3. 无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 . c- D, O/ [) q; j3 d  F
6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。