求助！我养的胎盘间充质干细胞状态是不是不正常？

michellejo

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请教一下，成品DMEM是什么？) [+ j8 ]- T2 y$ d# R% I8 v8 x
我们现在用的是hyclone的液体DMEM，含有酚红；已经确定培养细胞时培养基会逐渐变碱，刚刚测定是在ph7.8，公司的技术支持说是CO2浓度不够，要使用8%以上的CO2浓度，但是我看绝大多数的MSC都用的5%，所以也不敢贸然更换。
! W) X6 @- {( Z( x2 o% h你们用的是什么培养基吖？

单个核细胞

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8 [! d; E2 {, [- j1 ^0 M2 _/ G' f; F* m# O8 F
你可以试试Hyclone的DMEM/F12培养液（SH30023.01B）、FBS（SH30078.02），培养效果还不错，或者采用Gibco的血清。

luckywen

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, F' p9 I" ^7 ^8 r; j+ L/ G: r' h; f' B% I1 O) ]  z
哦，不好意思，还以为你是现配的呢。那我们用的是一样的，可能问题出在培养箱了吧，希望可以早点解决。

蔚海橙天

关于培养基：干粉培养基过滤前我一般滴定成7.1左右，自己的经验是因为用过滤器过滤后pH会升高0.2~0.4，一般在7.4左右，另外，自己配的干粉培养基在4度保存时间长后会偏碱性，所以一次不要配太多，配好后最好在一个月内用完

quge_00

& B! _' S5 ^7 x: Z. v4 Z
, o7 L8 W0 Q" _! p3 R' n看着还可以，可能是细胞比较稀，长起来传代后会好点~~
* o% h* J: k* i5 w* K9 _5 p不要用培养皿，换用小培养瓶，传代一小瓶传一大瓶，& D: Z* @9 S1 A+ Q* M
我的原代组织块在培养皿（以前用的，现在都用培养瓶做原代）. R. ?! v9 G1 h
长出来的就是这个样子，, ~0 r/ V$ O4 ~5 |: f7 X! F& J
传代后到培养瓶里就变得细小锐利了，& J6 o) ?7 ?, q' G( j& b
可能是粘附力不一样的原因吧~

相文

我觉得状态不好，老化了，细胞状态好应折光度大，细胞立体感强。

金戈

从照片来看，细胞生长还是可以的。楼主要有信心。另外胎牛血清批间差异还是很明显的。培养体系最好不要换来换去。

未来之星

回复 michellejo 的帖子. r: C! s2 ]( r8 g3 T( w

3 W3 d1 c* k" ?# `% z这些细胞是几天？

pauldong

回复 michellejo 的帖子9 i; r* B" P- \$ ?: g2 a
; d3 x- n7 s' t5 d) F
照片上看起来细胞是有点老化了，P3代MSC应该比这细胞小，而且长梭型很明显，不应该是多角形居多，不知楼主取的是胎盘那一块的组织，有么有做流式检测一下MSC表面标志。胎盘MSC取材比较重要，因为胎盘组织的结构还比较复杂，一般蜕膜组织MSC纯度最高，如果不小心多取了绒毛膜或羊膜组织，那边培养出来的细胞就不纯了。建议从源头分析取材是否有问题，然后再检测下表面标志，配液的话我感觉问题不大。

jenny114402

是细胞分泌物吧，你这是多少倍下的图片