求助！我养的胎盘间充质干细胞状态是不是不正常？

michellejo

回复 luckywen 的帖子
4 j; s" ]; i+ v. Y, ]# R" O
3 \. z4 D( G7 s0 E8 X) ?请教一下，成品DMEM是什么？
6 O- {. r# g' a; s7 s6 P我们现在用的是hyclone的液体DMEM，含有酚红；已经确定培养细胞时培养基会逐渐变碱，刚刚测定是在ph7.8，公司的技术支持说是CO2浓度不够，要使用8%以上的CO2浓度，但是我看绝大多数的MSC都用的5%，所以也不敢贸然更换。
1 ^( ?( C. }. }# s: q- k4 a你们用的是什么培养基吖？

单个核细胞

回复 michellejo 的帖子2 A- k1 K9 B8 I+ j9 F7 b
5 G$ t  c, ?6 k
你可以试试Hyclone的DMEM/F12培养液（SH30023.01B）、FBS（SH30078.02），培养效果还不错，或者采用Gibco的血清。

luckywen

回复 michellejo 的帖子
+ ^+ e( g; b1 {: p4 U3 \: F# X" m, ]6 K/ R& ?' C- ^
哦，不好意思，还以为你是现配的呢。那我们用的是一样的，可能问题出在培养箱了吧，希望可以早点解决。

蔚海橙天

关于培养基：干粉培养基过滤前我一般滴定成7.1左右，自己的经验是因为用过滤器过滤后pH会升高0.2~0.4，一般在7.4左右，另外，自己配的干粉培养基在4度保存时间长后会偏碱性，所以一次不要配太多，配好后最好在一个月内用完

quge_00

& H2 X/ \& i" a2 l) \9 i: R/ ^& H4 ~) A3 ]9 \+ D, Z
看着还可以，可能是细胞比较稀，长起来传代后会好点~~. C5 \1 v6 ]0 I
不要用培养皿，换用小培养瓶，传代一小瓶传一大瓶，+ W$ H+ ]( P5 r
我的原代组织块在培养皿（以前用的，现在都用培养瓶做原代）
6 @; j9 s$ H% v+ i3 G4 m长出来的就是这个样子，
" x& ]" p) w0 |3 F9 t' v传代后到培养瓶里就变得细小锐利了，
2 l" b- A# v+ O* {9 ~6 x" n5 x可能是粘附力不一样的原因吧~

相文

我觉得状态不好，老化了，细胞状态好应折光度大，细胞立体感强。

金戈

从照片来看，细胞生长还是可以的。楼主要有信心。另外胎牛血清批间差异还是很明显的。培养体系最好不要换来换去。

未来之星

回复 michellejo 的帖子% d9 B% v  I! h" O# c" X0 {

' s5 v1 j4 a7 w! m这些细胞是几天？

pauldong

回复 michellejo 的帖子, `: R3 W9 y; Q  e7 L2 k
- H5 D, T; C& q& v' g/ \2 B
照片上看起来细胞是有点老化了，P3代MSC应该比这细胞小，而且长梭型很明显，不应该是多角形居多，不知楼主取的是胎盘那一块的组织，有么有做流式检测一下MSC表面标志。胎盘MSC取材比较重要，因为胎盘组织的结构还比较复杂，一般蜕膜组织MSC纯度最高，如果不小心多取了绒毛膜或羊膜组织，那边培养出来的细胞就不纯了。建议从源头分析取材是否有问题，然后再检测下表面标志，配液的话我感觉问题不大。

jenny114402

是细胞分泌物吧，你这是多少倍下的图片