神经干细胞传代能用冷冻法么？

bin19900511

找到了一文章讲关于，贴壁细胞的消化方法介绍的。其中说到一种是冷冻法，原文如下。% D5 F1 s1 K# T2 d7 a  {
冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：1、用较多的4度的PBS洗涤一遍细胞(以6孔板为例，加1.5ml/孔)，2、再加0.5ml 4度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，3、轻轻吹打，细胞即完全脱落，4、按一定比例传代。& @9 [" T4 J1 L- @# {
但个人觉得我们传代的液体都要预热啊，4度PBS会冻死神经干的吧！是不是神经干不在这范围里面呢？但他描述的又和神经干所吻合，想问一下有高人这样试过么？有效果不？还是根本行不通？: P7 k3 M# c# E9 \$ \0 ^
呵呵，也算和大家分享一下，征求大家意见，探讨可行性。谢谢大家。（PS：如果能直接4度D-PBS就能让细胞脱落，那真是省钱又剩心呀，呵呵。）

歪歪

ES克隆，在室温下，放PBS里时间长了，克隆也散了。

bj123456

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这个不是很好吧，会对细胞影响很大。现在有专门可以降温就可以把细胞消化下来的专用培养皿。

ljs

“现在有专门可以降温就可以把细胞消化下来的专用培养皿。”请详细说明。我对这个很感兴趣。

Tim

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7 X. A- s. j( z6 Q" V1 S, V求原文
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辛西雅

胚胎样品组织分离时要用4度的PBS洗，我们培养的骨髓间充质干细胞都要用胰酶消化才能的

nculsa747

回复 ljs 的帖子. {8 Q( y- ?; [* e( _
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我之前看过一篇这样的文章，就是一种特殊的材料，温度变化时材料形态会发生变化，就像matrigel一样。

Tim

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求原文！！

Tim

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求原文