小鼠囊胚中分离液中加入PD98059后饲养层细胞状况差

zhoujiang

前几天分离小鼠ES， 在不加PD98059时，饲养层细胞较佳，且
, D: {2 @5 J) W( {! EICM也能够增殖；当培养液中加入50uM的PD98059抑制剂后，若干MEF细胞死亡，ICM也长不好了，不知是什么原因？哪位大侠有这方面经验，望不吝赐教！谢谢！

小刺猬2932056

你是用PD98059处理MEF吗？我见同学好像是用MMC处理的

zhoujiang

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7 N( M* M- e# y. R. u& B( \
' H/ t* f* d% q. r8 m. yMEF是用丝裂霉素处理的，状态很好，用它来作饲养层细胞，分离小鼠ES，分离液中（mES)培养液）加入的抑制剂PD98059（MEK1/2抑制剂），但囊胚接种后，MEF细胞变得形态很差，有细胞死亡，DMSO（1/1000）单独加入，不影响MEF细胞的生长。

zhoujiang

最近不加PD98059了， ICM也长出来了，初次传代后好象有少量的集落，继续做做看！