CIK细胞的表达和扩增问题

一米阳光66

各位高手，培养的CIK细胞的扩增情况怎样？培养14d后的细胞数目是多少？CD3CD56双阳性的比例多高？其中的关键影响因素是什么？是因子or培养基？

kiss2346

这个情况比较复杂 如果是病人外周血，一般培养基数都不高，14天基本上在5~7*10~9左右吧 ，个人感觉因子影响比较大 当然前提培养基要适当

流泪的鱼

CD3CD56双阳性的比例大于30%，有时候到达45%。如果是病人血，和病人体质有关。如果是脐血，个体差异和细胞培养基里的因子有很大关系。

一米阳光66

回复 流泪的鱼 的帖子
( x. m3 c. A! Z5 u$ U: [1 H0 U0 x+ N. ], ^: X. _) U, o/ E5 Y
谢谢楼上的回复，目前我们在做脐带血来源的，感觉个体差异以及因子对阳性比例的表达影响非常大，有的时候表达很低，也就10%左右。

一米阳光66

回复 kiss2346 的帖子
8 M9 W. E% g/ e- B/ b5 K  P6 Q& P
/ F. c3 M% p. b4 [谢谢楼上的回答，请问您是从50ml的外周血中分离后培养的嘛？感觉14天的数目也不低了，是用细胞培养袋养的吗？

romanyuo

14天收集细胞，其数量应达到1X10的10次方以上，细胞活力应在80%以上，CD3CD56双阳性细胞应达到20%以上。DC关键是GM-CSF和IL-4，CIK关键是CD3单抗和IL-2.

一米阳光66

回复 romanyuo 的帖子. S6 E3 Q7 Y4 q6 b6 p

, ~" N$ ?+ w9 E8 h; L谢谢楼主的经验之谈，CD3单抗 是用的国产还是进口，是做的脐带血吗？CIK细胞扩增的很好呀！牛！

kevin5me

我做的病人的，培养10-12天，CD3CD56双阳性细胞13%左右，细胞总数在2-3*10的9次方，几乎每次都这样。

jenvy121

回复 romanyuo 的帖子( x, ^3 L# N5 f# C7 y
* W+ F; A. z& q! J
请问你说的是病人的外周血还是脐血来源的外周血，如为病人是否是动员的外周血还是直接采的外周血，按照收集是到达十次方，那么起始血量是不是很高，如很低，那扩增倍数可就是千倍以上了吧。另外CD3不知您用的是哪里的，可否告知

wwxx66

我们实验室的病人各不相同，与病情及体质有一定关系。一般我们实验室14-16天细胞的数量为1-2*10的10次方。双阳性表型15%-45%。