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楼主

发表于 2012-9-12 23:12 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

干细胞之家微信公众号

用trypsin（0.25%）消化传代的过程中，吹打成细胞悬液之后离心，弃上清，加入PBS重悬细胞洗细胞的时候为什么有些细胞吹打不开？成线样连接在一起。

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沙发

发表于 2012-9-13 00:36 |只看该作者

你很可能是消化过度了，以后主要消化时间

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优秀会员

藤椅

发表于 2012-9-13 08:37 |只看该作者

可能原因：一，细胞过密；二，消化过度，DNA释放。

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板凳

发表于 2012-9-13 09:19 |只看该作者

你是什么细胞呢，细胞密度是多少？

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优秀会员金话筒

报纸

发表于 2012-9-13 09:24 |只看该作者

细胞之间有各种连接，胰蛋白酶只能去除蛋白链接（缝隙以及紧密链接等），还有一种连接靠Ca+以及Mg+,加入EDTA可以消除细胞成团问题

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地板

发表于 2012-9-13 09:51 |只看该作者

细胞生长时间过长,密度过高,没有及时传代,消化时会成片状或线状.
消化时间掌控不好,也会导致细胞成团块状
过筛网滤一下再离心接种

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7楼

发表于 2012-9-13 11:10 |只看该作者

我也遇到这些问题了，新手真是苦恼多啊

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8楼

发表于 2012-9-13 11:34 |只看该作者

你传代什么细胞，还需要离心再PBS洗的?直接在离心管里吹打的么，你将细胞转移到培养皿上再吹打看看

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9楼

发表于 2012-9-13 11:47 |只看该作者

通常，当样本被反复冻融或在酶的消化解离作用下会生成“细胞团块”。这是由于实验环境压力使样本中的细胞死亡率升高，导致死亡细胞释放“粘性的”DNA分子，这种分子会将周围的细胞黏连在一起结成团块。

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10楼

发表于 2012-9-14 09:56 |只看该作者

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嗯，以后注意

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