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楼主: huajie881026
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你养的间充质干细胞能传几代?   [复制链接]

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发表于 2012-9-18 19:38 |只看该作者
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回复 sdwzg119 的帖子* O: ?5 [2 \0 K* D* {  |6 X1 [

8 b, r( j* D( A; Z' {6 H3 i嗯  受教了   请问您用的是什么培养体系呢?

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发表于 2012-9-18 19:48 |只看该作者
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/ R0 H- B# ]. {: y  V
9 ^9 r; @8 Q( p6 |3 [请教您脐带是如何分离的?酶消化还是组织块贴壁爬片法?

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发表于 2012-9-19 09:33 |只看该作者
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: p* Q# {1 ?# Y7 D# |! V. {" H3 p% i5 O5 [8 g( A
请问您使用的是什么培养体系呢?是DMEM-LG+10%FBS吗?还是无血清培养基?加bFGF了吗?
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发表于 2012-9-19 09:56 |只看该作者
传代代数与年龄有关,也有类似的文章。我做同一种动物的,有的8、9代就老化了,有的十几代还问题不大,年龄相似,我想与培养方法也有很大的关系,至于传100代以上,我想那是永生化了吧。本质上,间充质干细胞不是可以无限传下去的细胞,你也不必过虑。
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发表于 2012-9-19 12:17 |只看该作者
如果只是用普通L-DMEM+FBS的话,是很容易变大变宽,细胞分裂变慢的,因为这种培养基不是干细胞培养基啊~ 用点好一些的培养基吧,好多公司都有卖~
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发表于 2012-9-19 12:32 |只看该作者
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) }3 y4 g: o$ w' n+ e/ F; t3 L. Y. m- ^
干细胞培养基很贵啊,而且我养细胞很多,消耗很大的!

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发表于 2012-9-19 15:43 |只看该作者
我养的是大鼠的骨髓间充质,最高培养到10代(没继续往下),连续培养,没冻存过。8代以后增值能力较弱,细胞变宽的数量增多。第10代的时候过流式,跟前面的2代没区别。分化能力没对比过。文献说大鼠的能传到60代以上,不过没试过。
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发表于 2012-9-20 09:33 |只看该作者
一般是10代以内做实验都没问题的,听说骨髓间质干可以传到20代。。。。可我没做过这么久!!% F/ k+ ?4 P+ f1 I' c9 ^8 H/ {5 ^
自己做骨髓间质干实验的话,最的代数最大的传到7-8代,一般8代以上的都不拿来做了!
5 n$ \0 q0 W% B' {胚胎干细胞好像没有这个限制,我拿到手的细胞都是10代以上的了,只是帮别人养了一段时间。。。
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发表于 2012-9-25 01:05 |只看该作者
MSC的传代次数和以下几个因素相关:
' e. X& q1 U- ]3 N! Q培养基情况、研究员操作水平、细胞来源情况9 t1 P! G: s* w; W3 o  C* f% \0 Y7 }
不过一般不会传很多代,公司生产用于临床的干细胞也就在P4到P5,' P! m+ `: `4 @3 b
传代次数太多的话就算表型和形态都不变,其干性也会降低的。
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发表于 2012-9-25 09:30 |只看该作者
回复 firstaider 的帖子! t+ J, {! _9 U2 E: X* u8 O

' s7 L2 u* F( Y) b( N" Q5 S0 d. O谢谢指点!
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