N2B27培养基

mayiwaiwai

请问各位大侠，这个培养基有固定的配方吗，看文献用的都不太一样，是不是加了N2和B27的培养基都叫这个名字呢？

genedu

回复 mayiwaiwai 的帖子* q; r& @% u7 @& ^7 W

; R0 u6 I+ j8 X) M1 A建议您看看应启龙的那篇ground state文献

wbj1983

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" _2 U$ g9 ]2 S* ~6 Q. [1 j
) d8 C2 P  Z+ a1 H9 P5 S% }: J8 V基础培养基（DMEM/F12或neurobasal）+N2B27+LIF+2i+β-巯基乙醇+Glutamax+双抗，这个培养基我们实验室通常叫做N2B27培养基。这个培养基是适合用feeder free ES 细胞培养，不知道您是用来培养什么细胞的，不同的细胞培养基成分都有所不同的，希望我的建议对您的实验有所帮助！

hjd8886

我们实验室是：NeuroBasal+1%N2与F12+2%B27等体积混匀

mayiwaiwai

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3 Z/ J+ @: }& K5 P( P5 p% {- @! r$ ~" ^. K
谢谢你的回复，养的是R1细胞，也是想用feeder free 养的，用DMEM+FBS+LIF+2i+β-巯基乙醇+Glutamax+NEAA的组合来做，

mayiwaiwai

回复 wbj1983 的帖子5 C/ V$ P  E3 v0 Z5 U

+ H9 c/ I4 N9 O; m# N( K  Y9 U想问一下同学你的2i是怎么稀释的，所用的DMSO有什么要求么，比如说DMSO是不是需要过滤啊，可是加的这么少，新手，求指点

mayiwaiwai

回复 mayiwaiwai 的帖子  q, s% E) S" T( G: I5 A* Y
2 C3 M# `" D. t/ y, C0 V
自己回复一下，CHIR99021稀释用DMSO处理，用冻存细胞的DMSO就可以，没有特别的处理，稀释后分装就可以啦

wbj1983

回复 mayiwaiwai 的帖子& Z- c( v. c5 X, e4 z
; s( i) A: w* e' D; I- w
DMSO: SIGMA D2650，不需要过滤，现配成stock，用时按工作浓度需要加到培养中就可以，希望对你有帮助！

xiaocell

我们还加了BSA和insulin

mg1551

好吧