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mhqh

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楼主

发表于 2012-11-13 09:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请问大肠杆菌感受态细胞哪里买呢？katara（大连宝生物）的好不？谢谢大家！

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mhqh

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沙发

发表于 2012-11-13 10:01 |只看该作者

还有，我查到4种感受态细胞，BL21 plysS，BL21，TOP10，DH5a。我现在有些质粒，想扩增质粒，请问该选哪种呢？

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86964109

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藤椅

发表于 2012-11-13 13:09 |只看该作者

本帖最后由 86964109 于 2012-11-13 13:11 编辑 3 Q* { U0 U' S
6 e# G9 B% w! T3 x5 A
TOP10，DH5a 是克隆菌，扩增质粒用。: x4 t+ \9 i' J F. u2 h9 h
BL21 plysS，BL21表达菌，表达蛋白: l; k* P; Y8 X% v# o+ x
感受态一般都能挺好用，就看你需要哪种，你也可以买来当菌种，以后自己做

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kingdomofcat

新手上路

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板凳

发表于 2012-11-13 14:32 |只看该作者

我常用的克隆菌就是DH5a。BL21 plysS和BL21是进行原核表达用的，通常不用这两种菌来提质粒，不是提不出来，而是提出来的质粒浓度低易降解，当然有些拷贝数比较高的载体也能提的比较好，但易降解是肯定的。BL21是最常见的表达菌，表达成功率也比较高。BL21 plysS是用来表达毒性蛋白的，表达量很低，我不推荐。我本人喜爱用的表达菌是roster，是BL21的升级版，有氯霉素抗性，表达效果比BL21好。