细胞系A549成球实验

lijie107

各位高手大侠们，俺最近在摸索做肿瘤干细胞，想用A549富集干细胞，DMEM/F12培养基里添加bFGF，EGF,LIF,B-27，3天一换液，换液时直接吹匀，然后半量换液。在培养时，细胞透亮，有成片贴壁的，有成串的（2-15个左右吧），有结成小球的（一二十个）；可我不知道什么样才算是真正的肿瘤干细胞球，我也不太清楚怎么养，请各位指教，若能提供比较成熟的protocol，不胜感激，

lijie107

帖子快沉了，怎么木有人指教啊？有经验的分享下吧，比如耗材，以及细胞培养时的形态变化，传代时的操作细节，冻存……

linhua188

你可以上传个图片给我看看～～
# Q% f7 k$ k/ F" s6 g

lijie107

已经养了40天了，这有球吗？

lijie107

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' R: P. W: a, T8 [
# y/ J" x+ b: M. ~. n! G7 j6 _/ s图片已上传，帮我看下，谢了

ditiger

用肿瘤细胞直接分干细胞貌似有点去分化的意思，最好还是直接从肿瘤组织里分

617507911

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貌似你的细胞好像是贴壁的，你用了超低吸附孔板

lijie107

( m1 }2 s6 e$ O/ }- D) w3 f3 e' K+ E( J& m9 ~) J2 c
回复 617507911 的帖子3 _, t% u% w' f! ~
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非常感谢

lijie107

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bbbb

lijie107

回复 617507911 的帖子
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你好，这个必须要用超低吸附板吗，我确实用的是普通的corning板；请问你做时会出现这种细胞串、细胞团吗？求解答