DNA甲基化分析的心得---新人第一帖---求分，求谅解！！！

细胞海洋

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2 g( {. Y  P2 Y, n( t- d: g9 d# C- T" N- @; J: T
提完质粒 你没有酶切鉴定下么？
5 r: Z. T6 M$ S3 {8 q8 W你如果目的片段连的是T载体 可以考虑有EcorI单酶切鉴定下  再送测序, A7 x9 v  i( s: w' p8 O

killjap

必须要放到质粒上吗？这么干目的是什么？6 V  J+ q# U+ y" U
楼主要的就是DNA序列，只要扩增出来，PCR产物就可以拿给生物公司测序啊。

watchen198891

你BS处理的时间梯度有问题吧，我觉得应该还做一个18h的，对比一下18h和16h的效果，如果16h的效果优于18h的，才能得出你的结果，还应该有平行试验才对。个人意见而已。

Andyhigh

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  }1 I' m7 t2 E$ p5 C0 a: E2 j$ e, R! k
首先谢谢你的回复，这个试验已经结束了。' _9 h# V3 v6 ^
放在质粒上的目的是为了获得准确的测序结果。想问下直接用PCR产物测序，产物测序的结果可信度怎么样，尤其是开始的30-50个序列？？？# z7 k0 c& n9 K

Andyhigh

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# N' U1 U5 D. |) M4 }1 P- |. Z- ?) A7 g9 u! s$ K9 N8 D9 ^: v
试验已结束，只试验了16h的原因是 试剂盒上的步骤来的。