DNA甲基化分析的心得---新人第一帖---求分，求谅解！！！

细胞海洋

回复 食毕莫饥 的帖子  _% k* O! [' B4 n) q
8 Q! F+ p, u6 V! X( `! X5 \- f
建议你发新帖提问

461650833

回复 Andyhigh 的帖子
2 e! P# c  I1 }3 `! C4 s% ?: n+ u" X# i: U/ h
提完质粒 你没有酶切鉴定下么？" E& H( ^* e' J/ y1 ]
你如果目的片段连的是T载体 可以考虑有EcorI单酶切鉴定下  再送测序3 f3 c' E( u+ h3 L2 J

killjap

必须要放到质粒上吗？这么干目的是什么？  Y2 g2 z2 f# |  K, ~1 n; E
楼主要的就是DNA序列，只要扩增出来，PCR产物就可以拿给生物公司测序啊。

watchen198891

你BS处理的时间梯度有问题吧，我觉得应该还做一个18h的，对比一下18h和16h的效果，如果16h的效果优于18h的，才能得出你的结果，还应该有平行试验才对。个人意见而已。

Andyhigh

回复 killjap 的帖子
3 j$ f4 P' L4 m% O" P* F) M
+ P7 a/ @& t: S首先谢谢你的回复，这个试验已经结束了。1 n2 m5 l( W; J) S+ }: Z* h
放在质粒上的目的是为了获得准确的测序结果。想问下直接用PCR产物测序，产物测序的结果可信度怎么样，尤其是开始的30-50个序列？？？
: `: B) K5 N& ^/ R' z# B

Andyhigh

回复 watchen198891 的帖子
5 `8 e" r4 i+ A5 k, }1 z' a( s- {" [
试验已结束，只试验了16h的原因是 试剂盒上的步骤来的。