关于细胞提取率问题

Wulianggen

我的细胞离心后每次收集到的都比较少，请问在操作前、中、后有什么需要注意的地方，或者比例的配制需要注意什么，怎么能提高细胞收集的量

sunflower636

回复 Wulianggen 的帖子# d9 z* H6 B5 b* z; I! y

" U" K6 m' F0 d" I. N5 }. g5 }- n可以说的清楚点么？你是做什么细胞？标本量是多少?什么方法提取？

lql2006wh

先考虑这几个问题吧：确定离心前细胞很多，离心去上清后细胞损失很多？离心前细胞悬液粘稠吗（纯细胞很好离下来，但想组织消化液之类的就不太好离下来）？你用的离心力离心时间确定能把细胞沉淀下来吗？是去上清的过程损失的细胞还是怎样？

sailree

因为不知道是什么细胞，大概想到以下几点愚见：
# F- e' Q% A, D. L" {$ X0 r1 D- S; p1. 不同的细胞会有不同的离心条件，离心的细胞是否选择了正确的离心条件，离心力太大（细胞粉碎）、太小（细胞沉淀不好）都会导致细胞损失。相对离心力g(RCF)=(转速(N)的平方*有效离心半径)/100000；还有可能就是如果用的是角转头的话，细胞可能会有一层薄薄的贴在离在管壁上，倒上清的时候就应该小心点。1 }* R: t: j2 D) o  Z
2.去除上清液的过程是否操作不当，直接损失了部分细胞。
0 q: H% ?. }) I. E* c& o& j3.选用离心管质量是否好，是否有部分细胞贴在了离心管壁上，倒上清的时候就应该小心点，重悬时候可以冲洗下管壁；) s. J9 I- w$ N1 h3 S5 d' D7 T
4.选择合适的细胞悬液体积进行离心，这个可以根据你的细胞摸索下。

院士站

离心前后做个计数,比较下,离心前计数比较少,那和你的操作提取有关,离心后计数少,应该和你离心力有关