有利用非病毒的方法诱导成功iPS的没有？

liuyul03

有没有人利用非病毒的方法获得iPS了，如果有，分享一下经验，谢谢！

birdflubirdflu

当然有~！ 有用相应转录因子的蛋白，诱导iPs也是可行的，只是没有病毒来得效率高。你可以找下相关文献。

ghfvcat

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3 \! B' F( V1 |+ U$ ]6 ^( i# L6 t3 m
蛋白诱导很坑，建议试试可以，不要抱太大希望。
- A+ p8 b* |* B& O, m! B据闻利用仙台病毒做的非整合诱导体系效果不错，life tec 好像有相应的试剂盒，不过可贵，你可以试一试。

liuyul03

Shinya Yamanaka 有篇 NATURE PROTOCOLS 的文章Generation of mouse-induced pluripotent stem cells with plasmid vectors， 不知道有没有按这个方法做出来的？
) z6 ~; K6 b  f9 `7 A

sirius_zou

当然是episomal vector方法啦% u$ T  Q: t5 K2 F. X
山中伸弥在他的综述里面都推荐这个无病毒无基因整合的方法，就是目前的诱导效率比病毒介导低2 a3 E0 p' V3 l  A& N& M- M
" d# L7 d! o! [0 n; S
补充内容 (2012-12-26 14:12):8 C4 v' E% D7 B4 L" m5 {1 m
参考文献是美国汤姆森实验室的俞君英发表在science上的文章，引用次数很高。4 S; M% j& C& [8 _1 t. u
Human induced pluripotent stem cells free of vector and transgene sequences

wbj1983

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, Y  W1 j9 O: [$ s) n/ A, H  P
7 y' W1 G- g1 U4 y% }& R! ^您好！这个问题现在已经相对比较成熟了，一下几方面可以参考：0 d3 B9 J/ o# v" p4 V0 g) k
1、非病毒载体诱导：比如tet-on/off-PB载体，PB为转座子，然后将把载体通过电转染的方法可以成功获得ips
1 t" e# R, g& B% o" U8 B2、重组蛋白诱导，此方法相对比较难，诱导效率低些
# p) e2 x* o* j3、mRNA诱导，这个办法相对比较费钱，但是如果诱导好的话完全可以临床应用，整个过程可以不用雪清河feeder，极力推荐0 F( {0 n# ~. _$ Q5 u: ~
    还会有很多更好的办法可以解决这些问题的，很多学者不停地研究这些热点问题！

Yedan

我想LZ的意思是论坛里有没有人做出来，或者说重复出来吧，Protocol千千万万，关键是在自己的lab能做得出来呀。目前国内的实验室还基本都是用的病毒系统（如果没有提到贵实验室，抱歉了……）
: ^9 g$ I# H  L6 N' o# \国外lab的系统很多时候搬回国内都不能很好的work，不是说国内怎么怎么不好，就拿个最基本条件来说吧，在上海空气质量都差，细胞房的培养条件怎么和国外比。4 J& H9 \; A7 i. |, M! T- W
当然老美发paper的时候也有不厚道的地方，数据太好看效率太高（这是跟咱们自己做的相比较），他们投出去没人去argue，但是同样的数据换成中国人投出去，就要被argue，说我们造假，这就是现实。
( k/ w" i$ T9 a6 c/ u. g$ m! |再插一句，之前Nature上那篇国人做的iPS成瘤问题的paper，发出来的时候，Yamanaka开年会的时候就很火大，说他们造假，可是文章现在都还在Nature上摆着，为啥呢，因为在老美那边做的。

jianghualiu0107

有篇用OCT4,SOX2,KLF4,C-MYC转录因子诱导FIBEROBLASTS 细胞到iPs你可以看以一下.