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CIK支原体污染是什么样的?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-12-26 14:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
CIK支原体污染是什么样的?最近有一份细胞不怎么长,培养液特别的红,不是正常的红:经验丰富的老师傅认为最可能是支原体污染,将细胞换液后浓缩,细胞开始长了,并且状态慢慢的变好了.
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沙发
发表于 2012-12-26 15:48 |只看该作者
细胞换液后浓缩,这是什么操作?我之前养的支原体阳性的细胞,一天培养基就变黄(酸),偏碱不清楚是不是支原体,不敢妄下论断,不过有可能是培养箱不行造成的,你可以检测一下空白培养基放培养箱,看颜色变化为生物引起或者是培养箱的问题
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藤椅
发表于 2012-12-27 00:14 |只看该作者
细胞培养支原体污染照片
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板凳
发表于 2012-12-27 09:29 |只看该作者
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回复 yinfuhua 的帖子
7 @- [' B4 x) K/ }
% a: J7 F6 y8 p2 S6 H1 m( j0 p支原体污染在显微镜下看不出来的

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报纸
发表于 2012-12-27 09:31 |只看该作者
回复 xiaocell 的帖子" D( R' T& b  y  f" j
; ~* q4 V& b0 Y/ V  u8 B
可以看细胞状态的,已经破碎。(不是看支原体)
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地板
发表于 2012-12-27 14:37 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子
* d: I/ B, [( k+ \7 N
/ v, I# I! l& l: o* E0 _一开始1000多mL就没怎么有细胞,离心后换液加入100mL细胞密度才比较好,换液后才慢慢长起来了!
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发表于 2012-12-27 14:45 |只看该作者
回复 wwxx66 的帖子8 k: h+ w- z. s& U( k4 }6 z

/ _( O$ S# |2 ^; {1 a  I细胞之间的环境对生长很重要,养CIK是密度不能低,10的6次方每ml,浓缩一般是用生物半透膜去水和一些离子,你说浓缩吓为一跳。很多细胞都要高密度生长,控制适宜生长的密度很重要
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发表于 2012-12-27 16:17 |只看该作者
变红?应该是CO2的浓度太低了吧,导致培养基偏碱,换液后当然细胞状态好了,污染应该是酸碱度变酸为黄色
; ?2 ?/ w2 Q5 m
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发表于 2012-12-27 21:26 |只看该作者
我在做实验以及最近养细胞的过程中经常出现一些黑点状的东西,也不是太影响细胞生长,不知道是不是污染了?
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发表于 2012-12-28 13:07 |只看该作者
最好做一个支原体检测,排除支原体污染。一般轻度的污染是看不出来的,重度污染会影响细胞生长。3楼的照片细胞培养的状态已经很差了,最好扔掉。严重的支原体污染可以通过DAPI染色观察,但是最好还是用专门的试剂盒检测。
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