脐血间充质干细胞

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5 c; ?0 y% D+ k( g* I8 ^: X各位，有没有脐血间充质干细胞培养的同道？我培养了2个多月了，进展不大，希望能跟大家多多交流  ^; L  R3 R* I. a1 y, U+ }
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8 O: @) R  y$ c! ^. ~- ^: ?4 D  I我的脐血用淋巴细胞分离液分离后（15ml的离心管），可以看到白膜层，但是分离后再用D-hank's容易漂洗2次并离心后，镜下依然是大量的红细胞，培养7天后，仅有少量圆形细胞贴壁。这种情况是不是需要用其他办法把红细胞去除？首次换液在哪天好呢？

细胞海洋

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# ?1 \' T, |7 G( F& z, ^8 T6 b; [+ S我的脐血用淋巴细胞分离液分离后（15ml的离心管），可以看到白膜层，但是分离后再用D-hank's容易漂洗2次并离心后，镜下依然是大量的红细胞，培养7天后，仅有少量圆形细胞贴壁。这种情况是不是需要用其他办法把红细胞去除？首次换液在哪天好呢？

jiguojie87

去除红细胞可以用无菌注射用水裂解，以去除红细胞。

仁心-妙术

原代混入红细胞很正常的，不用去除，换液就没有了，本人经验首次换液一周，换掉的培养基不要扔，继续培养还可以养出来，部分干细胞贴壁很慢

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回复 仁心-妙术 的帖子7 H% O3 N: M, j  J7 r/ x$ j

* Z% t3 b+ k. N; F7 }谢谢。请问养脐血间充质不？我养的其中一批，养了20天，还没有传代,是不是不正常？我的培养基里只有15%的血清+D/F12，和谷氨酰胺，要不要添加转铁蛋白、生物素、胰岛素等，我怕细胞营养不足。

wind789

湖南干细胞 发表于 2012-12-28 17:11
  v4 k, \) }+ n" o$ g3 {各位，有没有脐血间充质干细胞培养的同道？我培养了2个多月了，进展不大，希望能跟大家多多交流

$ C3 s% ~) }  e/ y5 V2 F0 [
我试出来的方法是，白膜层清洗后加入过量培养基培养，贴壁第6天换液，换下的液体再贴壁培养。第一次贴壁里煎蛋状细胞较多，在再贴的细胞里养出MSC的概率很大。不过我还没有找到大规模培养方法。多交流。

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  U( C6 D& @% D' w换下来的液体继续培养还要添加多少比例新的培养基不？还是直接继续培养？我的培养基为15%血清+D/F12基谷氨酰胺，是不是要添加其他营养成分才够间充质细胞生长，他长得好慢，长到后来（20多天）都不怎么长了，但是还是没传代。

小时候就很酷

一般脐带血MSC长到15天左右就有克隆团了，15内天不用动培养皿，里面红细胞也不用管。慢慢等克隆长成麻团状后，消化传代。

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帮我看看，这是我的细胞http://www.stemcell8.cn/forum.ph ... p;page=1&extra=