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细胞滤网什么时候用?用多大的? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-1-5 15:08 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
各位大侠,小女子目前要做脂肪干细胞尾静脉注射,看各位的说打之前要过细胞筛,不然细胞成团易造成肺栓塞。我就想问下,细胞过筛是胰酶消化下来就过筛,还是注射之前摇摇再过筛再注射?脂肪干细胞它的直径到底是多少啊?查了下有的说是25-35um,有的是又说是25-200um。哎呀,实在把我给绕进去了,选筛子又犯难了!先用200目的过,再用400的过可行否啊?
' f7 a5 G2 l, ]& Y   拜托各位大侠了,急!急!急!
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2013-1-5 21:00 |只看该作者
应该是尾静脉注射之前滤,否则,过一段时间又成团了。如果细胞在消化后较短时间内就打的话,也可以不用过细胞筛,注射之前先看一看是否有肉眼可见的絮状物(细胞沉淀),如果有,必须过滤。一般70μm的就可以了吧
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藤椅
发表于 2013-1-6 08:37 |只看该作者
我以前也做过尾静脉注射,直接消化重悬后就可以。1ml的注射器本身针头就很小了起到了一定的过滤作用,有团的话是吸不上去也推不动的。
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板凳
发表于 2013-1-6 09:07 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
使用前,可以用DNase1,处理一下,细胞就不容易成团了,再过滤一下,就好了!
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报纸
发表于 2013-1-7 16:30 |只看该作者
我的细胞也是 消化过久了会导致蛋白析出,形成聚团,做流式之前都是用细胞筛率过之后再去做的
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2013-3-22 06:04 |只看该作者
回复 jy1233211234567 的帖子
: q- J- D) t2 o/ u1 f5 n! |6 t1 |  R% m
我们是胰酶消化下来过滤,我们用40um的过滤器,我不知道200目相当于多少um?对于脂肪肝细胞直径,我们每次都用自动计数仪计数,技术时有平均直径这个指标,大鼠来源的一般都小于25um,人来源的平均直径都小于35um。因此我们选用40um过滤(我们用的是人的脂肪来源干细胞)。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2013-3-22 09:17 |只看该作者
要注射之前消化比较好,细胞筛一般用200目(70um),人来源的细胞是这么做的。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2013-3-22 09:45 |只看该作者
一只用BD的70微米的滤膜,小鼠的话也可以用60微米的!
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发表于 2013-3-27 14:53 |只看该作者
细胞消化制成悬液,注意吹散,不要聚集成团,然后用输血器过滤,就OK啦
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