怎样取小鼠2.5天的胚胎？

lsjj619

取了很多次ICR小鼠2.5天和3.5天的胚胎，能取到少数约3-4枚，跟它实际生仔数量不符（一胎12-18个）。冲子宫、剪开子宫以及撕碎输卵管都试了，但一直并不成功，要疯了，胚胎到底去哪了？有经验的朋友赐教吧，谢谢啦

niyou

按常理，即便没有做超数排卵，每只小鼠也会有10-15个胚胎，超排后可能达到15-30个。这是我以前的经验。如果取3.5天胚胎，只需要从子宫颈分别向两个子宫角方向冲，待子宫扩张成管状充盈时，在子宫底（接近输卵管的地方）剪一小口，胚胎会随着冲胚液从子宫被冲出，然后在体式显微镜下找胚胎；如果取2.5天胚胎，从子宫底接近输卵管的地方剪断子宫，从子宫底朝着输卵管的方向冲胚胎，胚胎会随着冲胚液从输卵管伞端被冲出，然后在体式显微镜下找胚胎。其实说起来比较麻烦，看一遍即会。建议你找个好点的实验室或者有经验的师兄学习一下。可能以后你还会有很多疑问和技术上的难题，自己摸索不划算。

lsjj619

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) |6 b' [8 T8 d. N+ L) W& I嗯，谢谢

寒山拾得

2.5冲输卵管，3.5冲子宫。

ambassador

niyou 发表于 2013-1-13 18:27 1 O( Q2 I( n9 N9 U& Q
按常理，即便没有做超数排卵，每只小鼠也会有10-15个胚胎，超排后可能达到15-30个。这是我以前的经验。如果 ...

0 i4 l/ S! i( L6 `4 W) _这个很不错！学习学习！顺便问问你们实验室是？

CoolCell

用1ml的注射器，冲囊胚的时候，每侧用0.5ml的M16或ES培养基，针头插入的位置尽量靠近卵巢/输卵管这一头，往子宫颈方向冲，注意一定确认针头进入了子宫内部而不是在子宫壁里。冲出来后，体视显微镜下调节合适的焦距观察，一般一侧可以得到4，5个胚胎，两侧8-10左右。

许杰15

前面几位提的建议都很好，但是胚胎比较容易吸附到脂肪上或组织上，也会造成一部分损失。

宋红卫song

我前两天刚冲3.5天的胚胎。有几个关键点：尽量去除脂肪，因为脂肪滴会影响胚胎的查找；冲胚时最好能看到子宫膨胀然后猛然冲出；用表面皿，因为表面皿底部是凹陷的，胚胎会随着液体晃动自行沉到皿的中央；如果胚胎太少，可用高倍显微镜查找。