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如何高效的去除分化的人胚胎干细胞? [复制链接]

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楼主
发表于 2013-1-14 10:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教各位高手,我培养的人胚胎干细胞有一半多点是分化了的,有没有比较好的去除分化的克隆的方法?谢谢~~
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沙发
发表于 2013-1-14 12:27 |只看该作者
本帖最后由 michael1013 于 2013-1-14 12:30 编辑 9 w6 Y+ c% {* n. D0 p
* n; U; L# y% l( r2 I9 l4 z
我们一般是在镜下用枪头刮除分化的。但是这样做比较费眼睛,尤其是分化克隆多的话。
: l# A/ f# C9 l! i如果有经验的话,分化的细胞和未分化的用肉眼是可以识别出来的。也可以不用显微镜直接刮除分化细胞。担心挂不干净的话可以最后再显微镜检查一遍。
1 X2 ]# J- `3 Y& N( z5 f( w  M! k$ E! D" Z) K, I
可能不够高效
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藤椅
发表于 2013-1-14 13:25 |只看该作者
回复 michael1013 的帖子
. K$ W" F" Y" i; O$ d# u7 m; i( m
; L% X7 l& w6 D3 G- s2 s9 A谢谢。确实是这样的啊,酶消化的方法是否能行呢?
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板凳
发表于 2013-1-14 15:19 |只看该作者
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回复 nichifanlema2 的帖子
4 B( u5 S% ^' i- t) t3 F. c8 b
. Z0 o# w* S) z$ P貌似不行
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报纸
发表于 2013-1-15 13:51 |只看该作者
教你一个很有效的方法。如果你的分化的hESC不超过10%,那你就只需要把分化的克隆做上记号,然后把它们吸掉。如果你的分化的部分超过10%,这个时候除分化的话就会有点浪费人力了,那你牛只需要把未分化的克隆吸到一个新的培养板中培养,这么做是最有效的方法。你可以试一试。
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地板
发表于 2013-1-15 17:53 |只看该作者
回复 chentian820 的帖子8 |8 M7 E) E/ K2 L' x- v4 X$ L) H
$ }4 ?4 w$ L4 d' e5 ]: I0 d% e
感谢支招,不过培养的人胚胎干细胞是贴壁的啊,如何吸掉?

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发表于 2013-1-16 19:26 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子2 J  L$ S* |6 i& c+ l  g4 ~

! s- |# w# |+ x# l' r# B3 }: T0 v一般在体视镜下进行,如果没有的话,你就用小枪头戳一下
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发表于 2013-1-17 14:05 |只看该作者
回复 chentian820 的帖子4 H  h9 Q* p% t

0 s: A8 ]3 X: Q0 ~/ O# C. {请问您用的体视镜是什么品牌,什么型号的啊?多谢了。

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发表于 2013-1-17 15:54 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子6 `+ H4 v% S* [. y6 L

0 S. Z9 Z9 \; f% h' R奥林巴斯的,实际上国产的就可以了,但要配个超净台
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发表于 2013-3-27 23:27 |只看该作者
如果你用的是dispase消化的话,一般多传几代就干净了。如果你是在是分化很多的话,又没体视显微镜可以先在一般的倒置显微镜中将分化的集落圈出来,在消化之前用枪头或者移液管将他们刮掉。
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