请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

sunny.yc

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8 x0 ?4 C  ^' o' t5 E( w
7 S0 m$ T" k6 O你在养外周血的时候，也加入FBS了吗？应该是自体血浆吧
# l; U' s) L4 [2 v" {! \  C( L1 v) |$ b3 A
你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种
7 l2 S4 H& t8 w  ?1 N, C1 H7 X4 G
8 ^* C/ z1 u$ _: p3 j7 o因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的

bloodroses

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; W1 A- e8 T  A1 ?- q& Y( L- B. q/ k  G
养外周血的时候，是用的国产无血清培养基，没有加血浆或者血清。/ d- A. ~6 E  x, u: j0 J3 k0 X4 l
养脐血的时候，不加血清，只加10%FBS，或者只加10%自体血浆，都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。

kiss2346

做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血，少部分脐带血，个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了，你的外周血是正常人的吧？个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大

bloodroses

回复 kiss2346 的帖子4 O$ o* a! ^6 k0 W. s/ d
' q- X1 h2 z  Y  z! b3 S* M7 A
外周血是正常人的血，没有炎症也没有癌症。' I8 q8 O, G& J. k
请问你用的脐血，采血量是多少啊，血袋是多大容量的，抗凝剂是的成分和量是多少啊？
9 O' W. L; y5 y5 o6 j$ v谢谢。

kiss2346

回复 bloodroses 的帖子& I- s2 K/ [2 g7 X6 ?" p

2 e/ A4 M* p/ U- d" V; r一般脐血采血量在100左右，分离单个核大概在1.5*10~8左右 ，血袋容量是200的，抗凝剂是肝素钠

gejianyun

我想请教下，培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2，还要不要添加了IL-1和CD3？

wind789

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45 & h$ b' F( _! E- ~7 \5 ^
小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。/ C7 O& |$ G' M% C
诱导 ...

' M# v* h$ V  n: p; S/ V; m* X
楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊？一般在室温放了多久才开始分离的？

bloodroses

回复 kiss2346 的帖子" I: q* [8 i5 W; \4 U# v; D# f0 S
! L% U! ]! Z, m. A6 T
非常感谢您的回复。

bloodroses

回复 gejianyun 的帖子
( M& O6 x$ r  y
# _) x* `( B7 Y" ~& O换液的时候，我只加了IL-2

bloodroses

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7 G: o4 i7 o  A+ Y6 y
1 p* m2 y$ P8 F用的是200ml血袋，抗凝剂是枸橼酸钠，采血量大概60~80ml（含28ml抗凝剂），一般室温放置30~60min后开始离心。