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干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 免疫细胞治疗专区 请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3,CD56双阳性的问题
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请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3,CD56双阳性的问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-1-15 15:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
小弟刚刚接触CIK,养外周血CIK时,增殖团的数量和体积都相应增加,第7天双阳率是10%,第14天到了50%。
+ |+ t) e4 g  v- w诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml,之后2~3天半量换液,补充IL-2到300U/ml。0 x5 E7 S$ n' p+ [9 T4 }& r5 \
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
/ E! }' e: D) R可是养脐血CIK时,分离方法和诱导方案以及培养基都相同。# j& Y* F  w* G2 S; e! x( j9 l& A
第3天的时候,可见少量增殖团生成,到第7天检测时,双阳率在0.5%以下,6 [  Y+ o4 J1 A7 q8 ~3 y
之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS,以及在培养基中加10%自体血浆。( `. W# L, a- w- n2 E
重复4次试验,都是只见增殖团,流式检测时,双阳率都在1%以下。
6 ?! r) z# z( o7 L& k恳请高手帮忙分析一下原因啊,谢谢。
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沙发
发表于 2013-1-17 20:01 |只看该作者
回复 bloodroses 的帖子: Z8 t6 k  O  d% b
$ R2 a& e# `3 t4 _$ O4 T
脐血有很多性质与外周血不同,毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选,其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行,因为我也做过,效果时好时坏。
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藤椅
发表于 2013-1-18 09:09 |只看该作者
回复 liutianhua 的帖子* x3 {8 x: F- s6 Z$ [" F- l- H
1 i: p7 i4 N, y& P
谢谢您的回复

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板凳
发表于 2013-1-18 09:55 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
哎,我的问题和楼主恰好相反,同样的方案用在脐带血上养的很好,而用在外周血上却是一直死亡。。。。
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报纸
发表于 2013-1-18 11:34 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子6 S/ p" f  n3 V+ B+ x" P
0 I& [9 X+ v  u% F
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊?

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地板
发表于 2013-1-18 16:14 |只看该作者
回复 bloodroses 的帖子
+ {8 e# N2 b' e) D
- y* i8 z  ^+ x3 [! R和你的方案差不多,只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1,而且IL-2的浓度是500,之后也是换液,保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好,咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS
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发表于 2013-1-18 19:39 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子$ j! V% b9 g! ?* ^; A3 h. ?" D
& h. B+ J3 X9 U& }/ g! u6 M
外周血的怎么一直死亡呢,能传个图片吗?

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发表于 2013-1-19 22:01 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子
* B+ q) z9 D' c6 }
6 [4 I9 j, @$ J( |我的没有加IL-1,而且IL-2的浓度也只有300U
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发表于 2013-1-20 20:17 |只看该作者
bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
# {; d, K! s! P0 `: o小弟刚刚接触CIK,养外周血CIK时,增殖团的数量和体积都相应增加,第7天双阳率是10%,第14天到了50%。1 h8 r& s6 H' \4 E0 d: S. N2 m
诱导 ...
) R0 y: u. C- x
双阳率第14天到了50%,请问是是平均还是个例,如果是平均是什莫牌子培养基?

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发表于 2013-1-20 21:00 |只看该作者
回复 lyd20042004 的帖子. K7 x. T" L5 u, d* z5 ~# y- X
3 k# N& Z1 d. w. z8 x- Y8 q
目前的数据只是个例# r# l& O9 q6 A2 p  z8 U
数据还在积累中,平均值是多少,现在还不好说
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