请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
+ |+ t) e4 g  v- w诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。0 x5 E7 S$ n' p+ [9 T4 }& r5 \
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
/ E! }' e: D) R可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。# j& Y* F  w* G2 S; e! x( j9 l& A
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，6 [  Y+ o4 J1 A7 q8 ~3 y
之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。( `. W# L, a- w- n2 E
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
6 ?! r) z# z( o7 L& k恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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$ R2 a& e# `3 t4 _$ O4 T
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

回复 liutianhua 的帖子* x3 {8 x: F- s6 Z$ [" F- l- H
1 i: p7 i4 N, y& P
谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子6 S/ p" f  n3 V+ B+ x" P
0 I& [9 X+ v  u% F
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

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+ {8 e# N2 b' e) D
- y* i8 z  ^+ x3 [! R和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

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& h. B+ J3 X9 U& }/ g! u6 M
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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* B+ q) z9 D' c6 }
6 [4 I9 j, @$ J( |我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
# {; d, K! s! P0 `: o小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。1 h8 r& s6 H' \4 E0 d: S. N2 m
诱导 ...

) R0 y: u. C- x
双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

回复 lyd20042004 的帖子. K7 x. T" L5 u, d* z5 ~# y- X
3 k# N& Z1 d. w. z8 x- Y8 q
目前的数据只是个例# r# l& O9 q6 A2 p  z8 U
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说