请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。( Y. M$ o7 a5 q6 r0 B4 |' {, d
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。
* G% W+ l# G' S: R2 X培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。( P, n6 x( T6 z& k' n/ X
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
1 k1 a+ Y; O1 t, _, A$ B2 v3 k2 }% m# i第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
; r5 S" d: A& C+ Y2 p  i之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。/ Z2 o) B. [; k/ S  W( _& N
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。9 _' r  |1 k0 s9 \5 K6 e% R
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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/ @* E% y  @( F1 A1 E+ ?/ d  _& ]/ }; f. v
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

回复 liutianhua 的帖子- }, i9 C# |1 ?' f! t* A

$ I! e: u, ~5 V# R谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子$ M- `8 e+ Z6 C4 \- a; K

: f3 X6 e: E& _( V, _+ Z+ S, s请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

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# `- p, q* }2 X& _" ^$ D" O! _7 Q9 H- l$ T/ i0 V, z# E
和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子' a9 D, ~1 d& B( R8 _& y7 p
+ ~3 v0 |- Z5 g; n; y/ T/ f
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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9 {" n) o' U; h9 G+ u( P( k我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
0 X% V( E9 U7 q小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
8 N% r$ L3 C. K- `诱导 ...

+ S3 v: I  I9 ?/ Z& o
双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

回复 lyd20042004 的帖子# d5 t7 [( V" d. V

; ?! @# ~4 ~/ m" `目前的数据只是个例1 d' ?* E3 ]& h- ~& W3 ~
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说