请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
- D5 w: q0 v, L& n诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。" {& R# I- {* Y9 S, f; D
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
( a0 u2 N7 J9 [0 k4 C可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
8 R( N9 k: ?6 F1 \; u2 L! I, b第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
  a* {+ l% [- S1 ~0 k5 D3 F之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。
, c. l! [$ k2 d) a: Y, z* v重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
6 d3 ?" l3 ?/ l& _5 L9 U% q恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

回复 bloodroses 的帖子
: t0 f3 Z1 r" ~) D6 I' h6 ]6 q" ]9 N, ?: A
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

回复 liutianhua 的帖子
" s1 z, c: w1 A# q6 r6 ]- U; }& D  R$ J! U2 j) T
谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子
  _8 \. ]# L- I" V; [1 c8 `
5 D8 P, K3 \& R( y" o请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

回复 bloodroses 的帖子/ D- I& h- Q! x: t9 a# ]9 y- o1 z

  D0 o2 `: M0 Y" z2 F6 R+ P3 N和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子, H* c4 k5 ^8 p) N! k0 r

, ?/ ~: [# ]& X8 C& F* @外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子
9 C! p$ H+ h0 c* H8 }
) Y/ |+ {5 \5 s; A$ d我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45 : G$ v$ S: ?# I" p( Z
小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
9 E' q  W- C0 \7 t9 u" Y6 w8 g% k. F诱导 ...

+ |6 R# Z; p: \6 N$ j/ r, Y+ l/ g
双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

回复 lyd20042004 的帖子' V7 ~" @: y  D, O, \# q& D
; x9 B6 ]& B7 b  ?
目前的数据只是个例' _% k& u, m5 C! O+ [) F3 I% N. Q9 K
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说