请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。  L! z' C' Q3 F4 [
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。
, }% j! C5 J' ~* S培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。; _1 h% S* i' Q  b1 g% X) {
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。4 e# c5 H/ L, d3 {/ @
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
- b1 E. L, ^+ L  L之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。- x" S5 m$ u  o6 V
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。: _! m- q( p- Y! U
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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: D0 C# ^- U( y1 s+ z
1 [8 b% ]' w: R% w, X: N. x脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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2 _: X" g: q# i* E" @6 S8 c1 F% e8 D# \  `# S
谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子2 c* R. s4 R' Q; y  S$ G6 v1 Y& W
3 K% S8 s* _& f" e) y6 ]# p% i
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

回复 bloodroses 的帖子- U2 x+ o0 {7 W* M( X* Q- y
7 e6 c  p! B' O0 `" [, c2 w
和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子, g" \6 z, v- O; H4 h2 R2 s4 U

$ O( g" V0 q: X  r7 B) r" ]外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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" ]1 {! p3 X- F: ~9 R& t6 M
- j7 ^6 C! `* S8 b我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
' q2 G. i- m4 H( J# K8 k" Q9 X, B小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
* k) ?  i! G/ V3 h5 g诱导 ...

7 t- R/ Q% d, S! I双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

回复 lyd20042004 的帖子+ ^8 ?# i  ^- e
  R# H0 A! |. W. M# {
目前的数据只是个例' H/ P+ O9 M& M, g8 z
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说