请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。8 V) v$ b7 [: \* j
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。
4 m. ^8 x) g9 w: K% V4 M' H# B2 E培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
1 \1 H& g' P( p可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
. T8 h9 t) M( {/ x" Y8 Y9 R( k7 {第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
6 Q! X0 h9 I0 P: ?' c0 ?% J之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。2 M: T; ~- G8 f9 _1 `
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。- T2 E' Y, h+ U) M8 p) E- O
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

chimo100

我做跟你的方案差不多，第二天加CD3和IL-1a，脐血和外周血都可以做出来。脐血的CD3+CD56+要比外周血要高，而且脐血的CD56+单阳性的也比外周血多

zhenhuale

回复 bloodroses 的帖子# b1 K# P& d$ W( [
4 Y# Y- k% c9 x3 Z& \1 `: w
请问楼主用的是国产的那个厂家的培养基啊？比国外进口的好？

yangpan521

培养基 用X-VIVO15和GT-T551效果应该会好于1640吧？

weijunning

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  k4 Z0 ^9 W1 @! p6 E- S6 a$ E: g5 Y) F% }7 N' S7 M& u! s
之后只用含有IL-2的培养基进行扩增培养，其他因子不用加了。

luyue6453

回复 kiss2346 的帖子2 ^4 j  N& _" n% X! e" @

5 y6 W8 c( f$ L8 ?) L请教您，脐血CIK输注需要配血清吗？有相关文献吗？

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子! k& m+ F  b, A) m
  O+ i6 h! i9 L8 F# Q6 j7 r
能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看一下呢？想向您学习一下，多谢了~

孙帅帅

我们   最好时候才28%左右~~   你们是怎么培养的啊？

yizuiqiannianga

脐血和外周血的性质不一样，不能用同一种方法来培养，下次你可以试一下脐血用干扰素伽玛，白二，白一，以及CD3.而外周血在培养过程中不要用白一

sunny.yc

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; C* w( u" R; n8 @9 b4 s8 A
/ L' z5 u0 n3 ~% _如果你细胞培养量不大的话，可以添加50ng/ml的CD3单抗，不过成本就会高很多了