请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

sunny.yc

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- T1 ~; ~: L5 p3 G* N4 r
* N" v' p+ N7 x7 T; Z' E% `你在养外周血的时候，也加入FBS了吗？应该是自体血浆吧
$ y9 f/ I4 W4 e5 i; V
! q* ]6 I3 @2 [3 d0 y. Z你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种+ z# j  N7 ]- T
5 o) E0 w" r$ l/ O
因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的

bloodroses

回复 sunny.yc 的帖子  G: f) n! f0 j/ t
, |8 Z& a: s4 f, W& x! c& n
养外周血的时候，是用的国产无血清培养基，没有加血浆或者血清。
9 a, f  @' X3 p' O. G8 H% Q: K养脐血的时候，不加血清，只加10%FBS，或者只加10%自体血浆，都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。

kiss2346

做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血，少部分脐带血，个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了，你的外周血是正常人的吧？个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大

bloodroses

回复 kiss2346 的帖子! K, [! m: G& @4 s3 y- [
' D! C4 h% u9 V* C8 r* K" x& K/ E
外周血是正常人的血，没有炎症也没有癌症。
% _7 N3 M, P$ G4 L) `" L& x0 ]6 G请问你用的脐血，采血量是多少啊，血袋是多大容量的，抗凝剂是的成分和量是多少啊？
7 ]! e1 h* u) O% L谢谢。

kiss2346

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! `9 W& v8 Q- z( M( k  {, S/ S. \' I( w* c# X
一般脐血采血量在100左右，分离单个核大概在1.5*10~8左右 ，血袋容量是200的，抗凝剂是肝素钠

gejianyun

我想请教下，培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2，还要不要添加了IL-1和CD3？

wind789

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45 7 g; Z/ z+ h0 r2 w; B
小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
! N" i+ C1 C8 }% |7 y: b$ I诱导 ...

$ `2 G& S! _0 }楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊？一般在室温放了多久才开始分离的？

bloodroses

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+ p/ _% F7 p2 _& a7 y: j9 y, f# t- Z! m) f# J$ T6 ]
非常感谢您的回复。

bloodroses

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1 G) c/ M6 s: B. n! g1 q$ C5 s
$ `. |. G1 e' j4 M+ n) U4 |换液的时候，我只加了IL-2

bloodroses

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/ V7 T" G( F( R& ?! y0 m) H  v, z8 W; [. N
用的是200ml血袋，抗凝剂是枸橼酸钠，采血量大概60~80ml（含28ml抗凝剂），一般室温放置30~60min后开始离心。