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楼主: bloodroses
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请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3,CD56双阳性的问题   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

11楼
发表于 2013-1-21 12:44 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 bloodroses 的帖子
  V- M( n1 t4 s) ^% [" Z8 U/ y4 D; [' V+ h8 n
你在养外周血的时候,也加入FBS了吗?应该是自体血浆吧
% E+ y& P7 f/ A8 `  D& `) S7 u3 u) s) N0 x" J' l/ m
你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种
* s+ E+ B3 W/ @8 U( F9 K" Q' ~8 [& f" G9 l7 n' U2 c* U
因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的
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12楼
发表于 2013-1-21 16:18 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子* @+ n; y- @" p' O& z+ k

- T2 g4 ~9 c/ |/ Z/ F9 ]0 \养外周血的时候,是用的国产无血清培养基,没有加血浆或者血清。- t7 I1 P+ J2 v: w; p% o
养脐血的时候,不加血清,只加10%FBS,或者只加10%自体血浆,都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。
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13楼
发表于 2013-1-21 16:23 |只看该作者
做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血,少部分脐带血,个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了,你的外周血是正常人的吧?个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大
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14楼
发表于 2013-1-21 16:36 |只看该作者
回复 kiss2346 的帖子3 @1 F* R& h1 ]: ~$ H
3 B/ O8 R5 ?+ R& M1 a
外周血是正常人的血,没有炎症也没有癌症。
5 T- p3 J. P# j; t0 G" e' z请问你用的脐血,采血量是多少啊,血袋是多大容量的,抗凝剂是的成分和量是多少啊?
2 h  R. U$ \% W& L) q! M; _7 l' h谢谢。
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15楼
发表于 2013-1-21 17:02 |只看该作者
回复 bloodroses 的帖子/ _+ T* I" y* _! j  U

2 K. x) I# q: e) k) `一般脐血采血量在100左右,分离单个核大概在1.5*10~8左右 ,血袋容量是200的,抗凝剂是肝素钠
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16楼
发表于 2013-1-22 08:53 |只看该作者
我想请教下,培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2,还要不要添加了IL-1和CD3?
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17楼
发表于 2013-1-22 09:14 |只看该作者
bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
3 H% h+ {7 F9 k小弟刚刚接触CIK,养外周血CIK时,增殖团的数量和体积都相应增加,第7天双阳率是10%,第14天到了50%。% S3 R: g$ m8 y- i" V
诱导 ...
4 e7 i6 d7 f6 p2 b9 ~
楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊?一般在室温放了多久才开始分离的?
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18楼
发表于 2013-1-22 09:38 |只看该作者
回复 kiss2346 的帖子
2 D; v0 }- k# N! r: Y( U. _. e
: b/ q' S' f5 Y5 H非常感谢您的回复。

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19楼
发表于 2013-1-22 09:38 |只看该作者
回复 gejianyun 的帖子
- y* P! z1 S$ u6 W) s
7 f8 d  G, m3 V" T% l换液的时候,我只加了IL-2
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20楼
发表于 2013-1-22 09:40 |只看该作者
回复 wind789 的帖子
$ I2 C8 h% r4 d/ ^5 P0 z$ [! G& v6 r7 K
用的是200ml血袋,抗凝剂是枸橼酸钠,采血量大概60~80ml(含28ml抗凝剂),一般室温放置30~60min后开始离心。
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