细胞的免疫荧光染色，需要加封闭液BSA吗？？

金戈

封闭的目的是为了降低非特异结合而引起的背景太高。一般大家都会选择做封闭这一步骤。' y9 E8 w: T- `+ W# ^
关于您说“那我加上封闭液   今天一个加一抗一个不加一抗，只加二抗做阴性对照  结果两个都染出来了 效果完全一样。。。”是指二者都出来了阳性结果吗？ 如果是的话，你看下你的二抗抗体属性，是抗什么的，是否与你用的封闭液有种属交叉反应，另外你的二抗是否洗干净再加显色液？

等待feng

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2 r2 |- D' v3 Z; E% X' q恩   我觉得也是   但要怎么才能排除这个非特异性染色呢？？？

等待feng

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我这个没有加封闭液，结果只加二抗的也染了出来  效果和一抗二抗都加时效果差不多。请问这是怎么回事？最后您那句  显色液是？我貌似都没有加过那个东西啊   

金戈

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7 V5 ?6 j: z+ A; q0 c! w$ e4 vo,抱歉，看成免疫组化了。免疫荧光不需要加显色液。用的是荧光标记的二抗。说明你的二抗非特异结合很严重。加封闭，另外也还是依然要看二抗的属性