关于液氮冻存细胞解冻的问题

newjack920

40度水浴锅中，轻轻摇晃冻存管至融化或只有少许冰晶，大概也就1分钟不到的样子。

老姜

回复 wind789 的帖子: f  l9 ?9 Q4 _& T3 @

- d/ X0 `3 j1 k9 z$ o没有做过这方面的统计。我感觉在实际应用中这个计数对我们所有人的实验欠有知道意义，因为标本源不同，离心机的半径不同，洗涤液的不同，同样转速下离心效果不一。个人见解仅供参考。

daifenghao

我们一般是39度不断摇晃温浴1-2分钟就全部溶解了，吸出细胞加入20ml的培养液中洗涤两遍，再传代。原理还是慢冻速溶

漂泊的风

10 min时间太长了，这样细胞会受不了的，建议37度2 min即可，慢冻速溶；另外洗涤用培养基即可，用PBS会对细胞有所伤害
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帝国黑骑士

解冻的时候不能太死板的！10min  这都没必要，水温设置在37度-40度  都可以，在复苏时都摇摇，接触充分看见大部分为液态了还有一小小块冰块最好！这样对细胞的活性比较有保障！

举锅

40℃？太恐怖了吧，拿人来说，正常体温37℃左右，发烧到40了就会感到很不爽了，之前听人说37℃内如果完全浸泡在水浴中5-6分钟是没问题的，不过我没有敢那么做过，也不需要。37℃最多1分半钟就化了，只要没有冰块状的东西了就可以用了。还有DMSO是有毒的，特别是在温度比较高的时候。