脐带间充质冻存

湖南干细胞

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9 k5 D2 Q" f; i6 f" j6 v$ W+ o谢谢，我试试。

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2 p) o0 O/ Z; a6 Y7 R) q谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子; L" U% D# p8 t: D! Y6 {- e- y
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用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

湖南干细胞

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- t6 L9 a( ^5 D谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶+ z& \: l4 o' _
复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

湖南干细胞

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" n1 m1 ~; C0 m5 L2 ]* q! e1 ~; H7 R5 w% I% p
这个主意好，谢谢

湖南干细胞

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& A- @% Z6 M5 w好的。8 z$ J, K4 ^0 ?& {- {( y

湖南干细胞

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今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
* _9 b! ?  b; e- I1 |/ A( V; |9 _“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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" H! c. r0 `0 b/ i! T- W/ `4 C& X4 x- ]1 J2 X9 y  c
冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。