脐带间充质冻存

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4 ]# T: g4 Q8 n( M谢谢，我试试。

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  l% ~( i% ?' g: W; l4 t8 N% s; e" D- D6 E6 k+ ]
谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子1 M9 m: {: ]+ J8 U' I

0 U, N) \5 ]% ~; y用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

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  _) g, f9 g% g8 x& C5 r3 P
: j# ~; t0 Q' o" v谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶
* A1 h# j% e; K& C4 x% h复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

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$ K5 W' }! S$ a: B
% p+ e; [1 K5 d* o& `这个主意好，谢谢

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) k4 |5 k- \, N0 H, k
好的。2 Z2 Z, T4 M1 }

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3 b1 q7 {; E/ j, l5 ?
8 R0 F5 M( y) e- E% ?9 V- t今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
! R7 t' T6 l5 [* E“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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5 D  X' o0 j* _+ M6 z" i; K0 w8 k
冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。